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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠牙周膜成纖維分離自牙周膜組織；牙周膜（牙周韌帶、牙周間隙）是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束，纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi)，另一端則埋于牙槽窩骨壁里，使牙齒固位于牙槽窩內(nèi)；牙周膜內(nèi)有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細(xì)胞（PLFs）作為牙周膜的主體細(xì)胞，是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞，它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能，還有吸收膠原吞噬異物的能力，還參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程?，F(xiàn)在，利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠牙周膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠牙周膜成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human killer cell immunoglobulin like receptor (KIR) ELISA Kit 人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒

HumanscavengerreceptorB,SRBELISAKit 人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-Epstein-Barrvirusaibody,EBVELISA試劑盒人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物結(jié)合吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測試劑盒(包括萃取)20次

HumanVitaminD-bindingprotein,DBPELISAKit人結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-22 ELISA Kit

Mouse leukemia inhibitory factor (LIF) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠白介素-1b(mouse IL-1b) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-8/CXCL8ELISAKit大鼠白介素8規(guī)格：48T/96T

通用型黃瓜花葉病毒(CucumberMosaicVirus;CMV)試劑盒20次

ELISAKitADH大鼠乙醇脫氫酶規(guī)格：48T/96T

CD36重組食蟹猴 CD36 / SCARB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

LN (laminin 0.5mgLN (laminin) 層粘連蛋白(多肽抗原)

CASK重組人 CASK Kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

ENO3 Protein Human 重組人 ENO3 / beta-enolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CLEC3B Protein Mouse 重組小鼠 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠牙周膜成纖維細(xì)胞LN (laminin 0.5mgLN (laminin) 層粘連蛋白(多肽抗原)

ENO3 Protein Human 重組人 ENO3 / beta-enolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD36重組食蟹猴 CD36 / SCARB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CLEC3B Protein Mouse 重組小鼠 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CASK重組人 CASK Kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用