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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

?小鼠骨髓來源巨噬細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠骨髓來源巨噬分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應(yīng)。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠骨髓來源巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠骨髓來源巨噬采用分離骨髓單個核細胞經(jīng)細胞因子誘導(dǎo)分化法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠抗復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat parathyroid hormone (PTH) ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒

HumanGlucoseanspoer1,GL1ELISAKit 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GL1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISA試劑盒人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞總RNA分離試劑盒20次

MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠可溶性P-選擇素(mouse sP-Selectin/sCD62P)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠P物質(zhì)(mouse Substance P)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠催乳素(mouse PRL)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠孕(mouse PROG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

大鼠三葉因子2(TFF2)ELISA試劑盒 ，英文名： TFF2 ELISA Kit

Mouse signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒

Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit 大鼠酶(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHAase(HumanHyaluronidase)ELISAKit人透明質(zhì)酸酶規(guī)格：48T/96

細胞半胱蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測試劑盒20次

RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

FZD10重組小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

Angiotensin II receptor(Ang II 0.5mgAngiotensin II receptor(Ang II ) 血管緊張素Ⅱ受體(抗原)

TEK重組人 Tie2 / CD202b / TEK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白 (His 標簽)

IL20RB Protein Rat 重組大鼠 IL20RB 蛋白 (Fc 標簽)

小鼠骨髓來源巨噬細胞半胱蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白 Recombinant Cystatin 3 (CST3)

CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白 (His 標簽)

CST6重組小鼠 Cystatin E / CST6 蛋白 (His 標簽) Protein

KLRC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (Fc 標簽)

CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。