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英文簡稱：293F細(xì)胞    

產(chǎn)品名稱：胚腎細(xì)胞-F克隆

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長特性：貼壁生長；懸浮生長

特征特性：

培養(yǎng)條件：懸浮培養(yǎng)用特制無血清培養(yǎng)基；貼壁培養(yǎng)用MEM-EBSS + NEAA + 10%FBS

傳代方法：1:2傳代

貨號：CS-X64010
公司產(chǎn)品僅用于科研公司有大量的優(yōu)質(zhì)細(xì)胞，還提供細(xì)胞的全程后期服務(wù)，可以向?qū)I(yè)人士咨詢詳細(xì)的細(xì)胞培養(yǎng)條件，凍存方法，及相關(guān)培養(yǎng)技術(shù)。

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)范：

主要功能：
（1）血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化：
（1）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細(xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

血管生成素2(ANGPT2)檢測試劑盒英文名稱：ANGPT2 ELISA Kit間隙連接蛋白43抗體包裝25g

血管生成素1(ANGPT1)檢測試劑盒英文名稱：ANGPT1 ELISA Kit緊密連接蛋白25抗體包裝5g

血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)檢測試劑盒英文名稱：PROCR ELISA Kit中心體蛋白78抗體包裝1g

血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)檢測試劑盒英文名稱：VEGFR3 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框146抗體包裝25g

血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR2)檢測試劑盒英文名稱：VEGFR2 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框154抗體包裝5g

血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)檢測試劑盒英文名稱：VEGFR1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框16抗體包裝1g

血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)檢測試劑盒英文名稱：VEGFD ELISA Kit9號染色體開放閱讀框78抗體包裝5g

血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)檢測試劑盒英文名稱：VEGFC ELISA Kit9號染色體開放閱讀框79抗體包裝25g

血管內(nèi)皮生長因子B(VEGFB)檢測試劑盒英文名稱：VEGFB ELISA Kit9號染色體開放閱讀框84抗體包裝5g

血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)檢測試劑盒英文名稱：VEGFA ELISA Kit9號染色體開放閱讀框85抗體包裝25g

血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(CDH5)檢測試劑盒英文名稱：CDH5 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框91抗體包裝5g

血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測試劑盒英文名稱：ANGⅡ ELISA Kit9號染色體開放閱讀框93抗體包裝100g

血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)檢測試劑盒英文名稱：AngⅠ ELISA Kit9號染色體開放閱讀框96抗體包裝500g

血管非炎性蛋白3(VNN3)檢測試劑盒英文名稱：VNN3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框98抗體包裝1g

序列相似家族3成員B(FAM3B)檢測試劑盒英文名稱：FAM3B ELISA Kit分裂周期蛋白5樣蛋白抗體包裝5g
293F細(xì)胞心鈉肽(ANP)檢測試劑盒英文名稱：ANP ELISA Kitα2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1包裝1g

心肌營養(yǎng)素1(CT-1)檢測試劑盒英文名稱：CT-1 ELISA Kit凋亡相關(guān)蛋白3抗體包裝5g

心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)檢測試劑盒英文名稱：cTn-Ⅰ ELISA Kit肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝1g

心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)檢測試劑盒英文名稱：cTn-Ⅰ ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族7抗體包裝25g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)檢測試劑盒英文名稱：AFP-L3 ELISA KitASCL2蛋白抗體包裝5g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)檢測試劑盒英文名稱：AFP-L2 ELISA Kit磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)檢測試劑盒英文名稱：AFP-L1 ELISA Kit磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g

腺苷高半酶(AHCY)檢測試劑盒英文名稱：AHCY ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g

腺病毒IgG抗體(ADV IgG)檢測試劑盒英文名稱：ADV IgG ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝500g

纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒英文名稱：TAFI ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g

纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒英文名稱：PAI-1 ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝5g

纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)檢測試劑盒英文名稱：PAI-1 ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝10MG

纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)檢測試劑盒英文名稱：PAP ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝1mg

纖連蛋白(FN)檢測試劑盒英文名稱：FN ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體包裝5mg

細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)檢測試劑盒英文名稱：Cyclin-D3 ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體包裝5mg
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡，co2孵箱。
1.2 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線。