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細(xì)胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1022  
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣  
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。   
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS  
傳代方法   1:2傳代；5-6天一次  
傳代情況  P3  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測(cè)  熒光法（-）　  
STR   -  
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1022實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后，將動(dòng)物處死，用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下，以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。SDS-PAGE凝膠電泳或轉(zhuǎn)移到PDF或NC膜上可得到清晰的10條彩色蛋白條帶，其中25kD為綠色條帶，75kD為紅色條帶，其余8條是藍(lán)色條帶。  
產(chǎn)品特點(diǎn)：  
三色預(yù)染，顏色鮮亮，條帶整齊，便于觀察。  
穩(wěn)定性能突出，檢測(cè)4℃放置兩年無(wú)明顯降解。  
用量少，節(jié)約成本，僅5ul即可*呈現(xiàn)（1.5mm，10孔梳）。  
廣譜多帶，一支即可滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。  
注意事項(xiàng)：   
1.本產(chǎn)品含有較高濃度甘油，常規(guī)-20℃保存為液體狀態(tài)，可直接使用。若冰箱溫度不穩(wěn)，導(dǎo)致結(jié)冰，可適當(dāng)分裝后置于4℃保存，至少穩(wěn)定6個(gè)月。  
2.Marker分離效果與PAGE膠濃度相關(guān)，若分離膠濃度低于15%，25kD以下條帶不易分離，但不影響綠色（25KD）及以上條帶。如果目的條帶小于25KD，建議分離膠濃度大于或等于15%。  
3.轉(zhuǎn)膜效果與轉(zhuǎn)膜時(shí)間有關(guān)，需根據(jù)客戶目的條帶大小而定，如果轉(zhuǎn)膜后較大分子量條帶有部分未轉(zhuǎn)膜成功，屬于正常現(xiàn)象。  
儲(chǔ)存條件：  
-20℃保存，有效期至少2年。  
中文名稱：預(yù)染彩虹蛋白marker (40-300 KD)  
英文名字：Prestained Protein Ladder  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
本產(chǎn)品為三色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)，由分子量從40 kDa到300 kDa的8種高純度預(yù)染蛋白質(zhì)組成，其中70 kDa和300 kDa條帶為橙色，50 kDa條帶為綠色，其余條帶為藍(lán)色。  
本產(chǎn)品適合應(yīng)用于SDS-PAGE時(shí)觀察蛋白電泳情況， Western Blot時(shí)判斷蛋白轉(zhuǎn)移效率，以及SDS-PAGE和Western Blot時(shí)的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)。  
本產(chǎn)品以凝膠上樣緩沖液形式提供，緩沖液成分為：62.5mM Tris-H3PO4 (pH 7.5)，1mM EDTA，2%(w/) SDS，10mM DTT，1mM NaN3以及33%(/) glycerol，直接使用，無(wú)需加熱。上樣量根據(jù)凝膠厚度和大小而定，請(qǐng)參考說(shuō)明書(shū)中的使用方法。  
產(chǎn)品特點(diǎn)：  
1. 八條帶組成的蛋白Marker分子量范圍廣泛；  
2. 與蛋白印跡膜具有親和性，可以監(jiān)測(cè)Western blot實(shí)驗(yàn)中的轉(zhuǎn)膜效率；  
3. 50 kDa綠色條帶、70 kDa和300 kDa橙色條帶組合便于實(shí)時(shí)觀察電泳進(jìn)程、判斷蛋白分子量。  
中文名稱：預(yù)染蛋白Marker(BIO-RAD)  
英文名字：Precision Plus Protein Dual Color Standards alue Pack  
分子式：分子量： 預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在水中的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在生理鹽水中的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在PBS緩沖液中的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在DMSO、乙醇等有機(jī)溶劑中的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方面的應(yīng)用，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在大鼠等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面的應(yīng)用。  
中文名稱：預(yù)染超低分子量蛋白Marker(3.3kD-31.0kDDa)  
英文名字：Ultra LowMolecular Weight Protein Marker  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉，每種預(yù)染蛋白含量約為40mg，配有一支1×上樣緩沖液。  
使用說(shuō)明:  
1.開(kāi)封后，溶于200ml 1×上樣緩沖液，可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝，每管10ml，-20℃貯存，每次取一管使用，避免反復(fù)凍融。  
2.使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。  
儲(chǔ)存條件：  
-20℃保存，有效期為一年。避免反復(fù)凍融，建議分裝凍存。  
中文名稱：預(yù)染彩虹蛋白marker (11-245KD)  
英文名字：Prestained Protein Ladder  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
本產(chǎn)品包含12種彩色預(yù)染的已知分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白，分子量范圍為11kD-245kD，每種蛋白含量約為0.2-0.4mg/ml。預(yù)染marker可以用于直接觀察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。SDS-PAGE凝膠電泳或轉(zhuǎn)移到PDF或NC膜上可得到清晰的10條彩色蛋白條帶，其中25kD為綠色條帶，75kD為紅色條帶，其余10條是藍(lán)色條帶。  
產(chǎn)品特點(diǎn)：  
三色預(yù)染，顏色鮮亮，條帶整齊，便于觀察。  
穩(wěn)定性能突出，檢測(cè)4℃放置兩年無(wú)明顯降解。  
用量少，節(jié)約成本，僅5ul即可*呈現(xiàn)（1.5mm，10孔梳）。  
廣譜多帶，一支即可滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。  
注意事項(xiàng)：  
1.本產(chǎn)品含有較高濃度甘油，常規(guī)-20℃保存為液體狀態(tài)，可直接使用。若冰箱溫度不穩(wěn)，導(dǎo)致結(jié)冰，可適當(dāng)分裝后置于4℃保存，至少穩(wěn)定6個(gè)月。  
2.Marker分離效果與PAGE膠濃度相關(guān)，若分離膠濃度低于15%，25kD以下條帶不易分離，但不影響綠色（25KD）及以上條帶。如果目的條帶小于25KD，建議分離膠濃度大于或等于15%。  
3.轉(zhuǎn)膜效果與轉(zhuǎn)膜時(shí)間有關(guān)，需根據(jù)客戶目的條帶大小而定，如果轉(zhuǎn)膜后較大分子量條帶有部分未轉(zhuǎn)膜成功，屬于正?，F(xiàn)象。  
儲(chǔ)存條件：  
-20℃保存，有效期至少2年。