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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供婆羅門(mén)牛皮膚成纖維樣細(xì)胞；BOS-3的報(bào)價(jià)，咨詢(xún)，稱(chēng)技術(shù)服務(wù)，咨詢(xún)選購(gòu)。
細(xì)胞名稱(chēng)     婆羅門(mén)牛皮膚成纖維樣細(xì)胞；BOS-3        
形態(tài)特性      成纖維細(xì)胞樣        
生長(zhǎng)特性     貼壁生長(zhǎng)        
特征特性      該細(xì)胞系來(lái)源于一雌性婆羅門(mén)牛的耳部皮膚組織，2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。         
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS        
傳代方法      1：2傳代；3-4天一次        
傳代情況     P2        
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測(cè)     熒光法（-）         
STR      -        
同工酶             
染色體             
使用權(quán)限     A類(lèi)        
培養(yǎng)需要滿(mǎn)足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀(guān)察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀(guān)察。

TNFAIP8L1     cDNA    Rat    大鼠 TNFAIP8L1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RPS6     cDNA    Rat    大鼠 RPS6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CLPS     cDNA    Rat    大鼠 CLPS 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TTR     cDNA    Rat    大鼠 TTR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TPPP3     cDNA    Rat    大鼠 TPPP3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GZMC     cDNA    Rat    大鼠 GZMC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PPIB     cDNA    Rat    大鼠 PPIB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GABARAPL2     cDNA    Rat    大鼠 GABARAPL2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RPL10     cDNA    Rat    大鼠 RPL10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
F2     cDNA    Rat    大鼠 F2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL6     cDNA    Rat    大鼠 CCL6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TIMM17B     cDNA    Rat    大鼠 TIMM17B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
UBE2N     cDNA    Rat    大鼠 UBE2N 基因全長(zhǎng)ORF克隆
COQ7     cDNA    Rat    大鼠 COQ7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
OSTC     cDNA    Rat    大鼠 OSTC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MGST1     cDNA    Rat    大鼠 MGST1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CPA2     cDNA    Rat    大鼠 CPA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
POLR2E     cDNA    Rat    大鼠 POLR2E 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GSTM1     cDNA    Rat    大鼠 GSTM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CTHRC1     cDNA    Rat    大鼠 CTHRC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MGST3     cDNA    Rat    大鼠 MGST3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRDX2     cDNA    Rat    大鼠 PRDX2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ECH1     cDNA    Rat    大鼠 ECH1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RPL15     cDNA    Rat    大鼠 RPL15 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GSTM7     cDNA    Rat    大鼠 GSTM7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NPC2     cDNA    Rat    大鼠 NPC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NGP     cDNA    Rat    大鼠 NGP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CNFN     cDNA    Rat    大鼠 CNFN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BPIFA2F     cDNA    Rat    大鼠 BPIFA2F 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SIN3B     cDNA    Rat    大鼠 SIN3B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
APOH     cDNA    Rat    大鼠 APOH 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DAD1     cDNA    Rat    大鼠 DAD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRL8A9     cDNA    Rat    大鼠 PRL8A9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TAF9     cDNA    Rat    大鼠 TAF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RTN1     cDNA    Rat    大鼠 RTN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
APOC2     cDNA    Rat    大鼠 APOC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CRYAB     cDNA    Rat    大鼠 CRYAB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SPC25     cDNA    Rat    大鼠 SPC25 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NDUFA3     cDNA    Rat    大鼠 NDUFA3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
UBB     cDNA    Rat    大鼠 UBB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ALDOA     cDNA    Rat    大鼠 ALDOA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RAMP3     cDNA    Rat    大鼠 RAMP3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ENO3     cDNA    Rat    大鼠 ENO3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RPL36A     cDNA    Rat    大鼠 RPL36A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SERPINF2     cDNA    Rat    大鼠 SERPINF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ACAT2     cDNA    Rat    大鼠 ACAT2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HN1     cDNA    Rat    大鼠 HN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
UQCRQ     cDNA    Rat    大鼠 UQCRQ 基因全長(zhǎng)ORF克隆