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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3
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更新時(shí)間:2017-06-01 08:52:18瀏覽次數(shù):349

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【簡單介紹】
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)銷售人員,我們將盡快為您解決。

細(xì)胞名稱     非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3        
形態(tài)特性      上皮樣細(xì)胞        
生長特性     貼壁生長        
特征特性      Vero-HCV-NS3細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的NS3基因,能穩(wěn)定表達(dá)NS3蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。         
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS         
傳代方法      1:3傳代,2-3天傳一代        
傳代情況     C10        
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測     陰性         
STR             
同工酶     同工酶鑒定        
染色體             
使用權(quán)限     A類


非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3實(shí)驗(yàn)方法和步驟 
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。 
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。 
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時(shí)間。
 (四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
 (五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

CXCL10     cDNA    Mouse    小鼠 CXCL10 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CXCL10     cDNA    Mouse    小鼠 CXCL10 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
IL33     cDNA    Mouse    小鼠 IL33 / NF-HEV 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
IL33     cDNA    Mouse    小鼠 IL33 / NF-HEV 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
FCGR1     cDNA    Mouse    小鼠 CD64 / FCGR1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
FCGR1     cDNA    Mouse    小鼠 CD64 / FCGR1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
CD200     cDNA    Mouse    小鼠 CD200 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CCL20     cDNA    Mouse    小鼠 CCL20 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
FGF2     cDNA    Mouse    小鼠 bFGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
FGF2     cDNA    Mouse    小鼠 bFGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
SIX1     cDNA    Human    人 SIX1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
EIF4EBP2     cDNA    Human    人 EIF4EBP2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
SRPX2     cDNA    Human    人 SRPX2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
HLA-A     cDNA    Human    人 HLA-A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
HLA-A     cDNA    Human    人 HLA-A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
IL17RB     cDNA    Human    人 IL17Rb 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
PCSK2     cDNA    Human    人 PCSK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
PGA4     cDNA    Human    人 PGA4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
PGA4     cDNA    Human    人 PGA4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
SLCO1B3     cDNA    Human    人 SLCO1B3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SLCO1B3     cDNA    Human    人 SLCO1B3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
FTO     cDNA    Human    人 FTO 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
FTO     cDNA    Human    人 FTO 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
RHOA     cDNA    Human    人 RHOA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
PPARGC1A     cDNA    Human    人 PPARGC1A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
PPARGC1A     cDNA    Human    人 PPARGC1A 基因全長ORF克隆 (表



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