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從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：BH4四氫生物蝶呤酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱：BH4 ELISA Kit

規(guī)格：48T/96

貨號(hào)：CS-2496E

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準(zhǔn)備：

1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

注意事項(xiàng)：

1.試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。

2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。

7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。

8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。

L-核糖 98%苯硫基乙酸乙酯 97%Anti-HINT1/FITC  熒光素標(biāo)記組三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體IgG

木聚糖 90%4-氟苯基乙硫 96%Anti-HIRA/DGGR1/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體IgG

三氯乙烯 光譜純, ≥99.5% (GC)2-氟茴香硫 98%Anti-Histone H1/FITC  熒光素標(biāo)記抗組蛋白H1抗體IgG

無水乙 AR,98%2-氟硫代苯甲酰 98%Anti-Histone H1 (phospho Thr146) /FITC  熒光素標(biāo)記化組蛋白H1抗體IgG

無水乙 GR,99%勞森試劑 97%Anti-Histone H1b/FITC  熒光素標(biāo)記抗組蛋白H1b抗體IgG

乙 for HPLC, >99.0%(GC)，含2%乙作穩(wěn)定劑3-羥基苯硫酚 96%Anti-Histone H2/HTB901/FITC  熒光素標(biāo)記抗組蛋白H2抗體IgG

硝烷  >99.0% (GC)苯硫基乙酸甲酯 97%Anti-Histone H2B/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白H2B抗體IgG

OP-4乳化劑 親油，羥值150±104-甲氧基茴香硫 98%Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139) /FITC  熒光素標(biāo)記化組蛋白H2AX抗體IgG

BH4四氫生物蝶呤酶聯(lián)免疫試劑盒東莨菪堿氫鹽 98%整合素α5抗體Integrin α5FAAH2  脂肪酰水解2抗體

柴胡皂苷C 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98%整合素β1/Integrin β1抗體FAAH1  脂肪酰水解1抗體

甜菊苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% (HPLC), 固體整合素αVβ3抗體F1 protein (YERSINIA PESTIS)  鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體

 98%胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體F1 operon positive regulatory protein(NT)  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端）

獐牙菜苦甙  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%型流感病血凝素抗體F1 operon positive regulatory protein  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）

七 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%型流感病血凝素抗體Ezrin  埃茲蛋白抗體

槐角苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%整合素αVβ5抗體EZH1/Histone-lysine N-methyltransferase EZH1  組蛋白賴氨N-EZH1抗體

槐果堿  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%干擾素調(diào)節(jié)因子1抗體EXTL  外生性骨疣樣蛋白2抗體

菝葜皂苷元 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%白介素6Exportin 5  核輸出蛋白5抗體

五味子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體Exportin 1/CRM1  染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區(qū)域穩(wěn)定必需蛋白抗體

紫草素  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%整合素αVβ1抗體EXPB-2  植物延展素-β

絞股藍(lán)皂苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，UV≥98%白介素-20抗體Exendin 4  GLP1類似蛋白Exendin4抗體

五味子乙素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98%干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)因子2抗體EVC2  膜蛋白EVC2抗體

五味子 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% 白介素-1受體相關(guān)激2抗體EV71 polyprotein VP4  腸道病71型/手足口病病抗體

延胡索乙素 97%化胰島素受體β抗體EV71 polyprotein 3D  腸道病71型/手足口病病抗體

操作步驟：

1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。