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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價

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50T痢疾桿菌PCR檢測試劑盒
痢疾桿菌PCR檢測試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 型號 50T
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):179

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【簡單介紹】
痢疾桿菌PCR檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品:
: Robinson資源名稱: 問號狀鉤端螺旋體 質(zhì)量規(guī)格:>95%前列腺素E2試劑盒毛萼結(jié); Maoecrystal A
球毛殼霉Chaetomium│globosum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于培養(yǎng)前列腺素E1試劑盒莫諾苯宗 ;4-Benzyloxyphe
: ATCC35106資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品前列腺素D合成酶

實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:痢疾桿菌PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:CP99399
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
?
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
鹽酸*(標準品)英文名稱: Parthenolide蓬亂蛋白1抗體規(guī)格:5g

鹽酸二弗林(標準品)英文名稱: Parthenolide肌Dystrobrevin β蛋白抗體規(guī)格:1g

鹽酸二雙胍(標準品)英文名稱: Rizatriptan異常*原/脫-γ-羧基*原抗體規(guī)格:5g

鹽酸二雙胍(標準品)英文名稱: Darunavir Ethanolate結(jié)蛋白抗體規(guī)格:1g

鹽酸二氧(標準品)英文名稱: VilazodoneDISC1 C端抗體規(guī)格:5g

*/*(標準品)英文名稱: DabigatranDISC1 N端抗體規(guī)格:100g

*(標準品)英文名稱: Repaglinide多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體規(guī)格:25g

*(標準品)英文名稱: Repaglinide結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體規(guī)格:5g

鹽酸芬戈莫德(標準品)英文名稱: D-(-)-Arabinose 多巴脫羧酶抗體規(guī)格:1g

*(標準品)英文名稱: D-arabinose防御素β1/Defensin β1抗體規(guī)格:5g

鹽酸呋喃它酮(標準品)英文名稱: Ferulic acid抗體規(guī)格:100g

鹽酸*(標準品)英文名稱: Ferulic acidDLX4抗體規(guī)格:25g

鹽酸桂利(標準品)英文名稱: Punicalagin (40%)DTX1抗體規(guī)格:100ml

鹽酸西?。藴势罚┯⑽拿Q: Punicalagin絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體規(guī)格:250ml

鹽酸西汀雜質(zhì) C(標準品)英文名稱: Rosiglitazone HCL 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體規(guī)格:100g
痢疾桿菌PCR檢測試劑盒草質(zhì)素(標準品)Herbacetin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

草質(zhì)素苷(標準品)Rhodionin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品

側(cè)金盞花醇,阿東糖醇,核糖醇Adonitol質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)

梣酮(標準品)Fraxinellone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

層粘連蛋白(925-933)Laminin110590-60-8

層粘連蛋白(929-933)Laminin110590-64-2

層粘連蛋白九肽,酰胺LamininAmide

*(標準品)Dimenhydrinate質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定

茶多酚;綠茶提取物Tea84650-60-2

茶黃素(標準品)Theaflavin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

茶黃素-3'-沒食子酸酯Theaflavin-3'-gallate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品

茶黃素-3-沒食子酸酯Theaflavin-3-gallate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品

*(標準品)Theophylline質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

*Theophylline質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

差向-加蘭他敏N氧化物Epi-galanthamine366485-18-9



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