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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4(SDF4)ELISA試劑盒洗滌方法
2021-11-18 閱讀(118)
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4(SDF4)ELISA試劑盒洗滌方法：
1. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體，甩干，每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。
3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。
5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng)，但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可終止)。
7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(mouse ACE)
小鼠雄激素結(jié)合蛋白(mouse ABP)
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(mouse ACTH)
小鼠Active Caspase-3
小鼠Active Caspase-7
小鼠Active Caspase-8
小鼠激活素A(mouse Activin A)
小鼠脂聯(lián)素(mouse Adiponectin)
小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA)
小鼠抗核抗體(mouse ANA)
小鼠血管緊張素II(mouse ANG II)
小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2)
小鼠心鈉素(mouse ANP)
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(mouse AIF)
小鼠抗利尿激素/血管加壓素(mouse AVP/ADH)
小鼠醛固酮(mouse ALD)
小鼠白蛋白(mouse Albumin)
小鼠血管抑素(mouse Angiostatin)
小鼠載脂蛋白E(mouse APO E)
小鼠B淋巴細(xì)胞刺激因子(mouse BAFF)
小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX)
小鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(mouse BCL-2)
小鼠腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(mouse BDNF)
小鼠腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體(mouse BDNF R)
小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2)
小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4)
小鼠骨成型蛋白受體1A(mouse BMP-R1A)
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2)
小鼠腦鈉肽(mouse BNP)
小鼠N端前腦鈉素(mouse NT-proBNP)
小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP)
小鼠CXCL3(mouse CXCL-3)
小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)
小鼠皮質(zhì)酮(mouse Corticosterone)
小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2)
小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(mouse CTGF)
小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (mouse CTLA-4)
小鼠細(xì)胞色素P450(mouse Cytochrome P450)
小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP)
小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)
小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)
小鼠CXCL1/KC(mouse KC)
小鼠(mouse cAMP)
小鼠環(huán)磷酸鳥苷(mouse cGMP)
