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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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人CREB調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄輔激活因子2實驗步驟

2021-10-28  閱讀(232)

人CREB調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄輔激活因子2實驗步驟:

1.標(biāo)本的采取和保存

可用作 ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛體液(如血清)、分泌物(唾液)和排池物(如尿液、業(yè)便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成

有些標(biāo)本可直接進行測走(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如龔便和某些分泌物)。大部分 ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有

除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標(biāo)本。在 ELISA中血漿和血清可

血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集應(yīng)注意避兔溶血

細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)以HRP為標(biāo)記的 ELISA;測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。

2.試的淮備:

按試劑盒說明書的要求注備實驗中需用的試劑。 ELISA中用的蒸餾水或去離子水包括用于洗滌的應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的中液

應(yīng)用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試剤應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試剤盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存

在 ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加加酶結(jié)合物加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在 LEISA板孔的底部避兔加在孔壁上

出不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器按規(guī)定的量加入板孔中。毎次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴以兔發(fā)生交叉污染也可用一次性的定量塑

料管加加樣。有此測定(如司接法EISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液再在其中加入

血清標(biāo)本然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時可用定量多道加液器使加液過程迅速完成。

4:呆溫:

在 ELISAI中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)即加標(biāo)本和加加結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間這一保溫過程稱為溫育(i

ulation),有人稱之為孵育,在 ELISA中似不恰當(dāng)。 ELISA固相兔疫測定抗原、抗體的結(jié)合只在國相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為逐步平衡的過程因此需經(jīng)擴散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。在其后加入的毎標(biāo)記抗體與同相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么 ELISA反應(yīng)

總是需要一定時間的溫育。

5.洗淙:

洗滌在 ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步張但卻也決定著實驗的成敗。 ELISA是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和姞合的標(biāo)記物的目的。通過洗

以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相。

細(xì)胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體

膜粘連蛋白8抗體

水通道蛋白8抗體

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體

凋亡抑制因子5抗體

水通道蛋白-3抗體

載脂蛋白D抗體

丁?;铣擅?抗體

脂肪細(xì)胞源性氨基肽酶抗體

線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體

ABL2蛋白抗體

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體

Acinus抗體

醋酸激酶1抗體

促腎上腺皮質(zhì)激素抗體

促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體

促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH 抗體

活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體

α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體

α1酸性糖蛋白2抗體

磷酸化水通道蛋白2抗體

細(xì)胞轉(zhuǎn)氨酶抗體

抗利尿激素/血管升壓素/加壓素/血管加壓素抗體

ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體

醛糖還原酶抗體




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