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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶elisa檢測試劑盒?檢測程序
2022-5-24 閱讀(146)
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。
8. 每孔加入100ul終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。
結(jié)果計算與判斷
1. 所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。
2. 以標準品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0 ng/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。
3. 根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)AMA含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。
試劑盒性能
1. 靈敏度：最小的AMA 檢測濃度小于4ng/ml。
2. 特異性：可同時檢測重組或天然的小鼠AMA。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11％。
