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小鼠活化素A(ACV-A)ELISA Kit

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更新時(shí)間:2017-03-31 13:15:17瀏覽次數(shù):391次

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 【樣品收集】

樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。

血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固2小時(shí)或4℃過(guò)夜,離心1000×g 10分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

 

小鼠活化素A(ACV-A)ELISA Kit 北京方程生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營(yíng)生物、儀器、試劑、耗材的公司,在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過(guò)不懈的努力,已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,代理許多*水平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域.公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó),在同行獲得*好評(píng). 特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價(jià)格實(shí)惠,*原代細(xì)胞,專業(yè)培養(yǎng)基,常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基,細(xì)胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑,氨基酸,抗生素,維他命類產(chǎn)品品種齊全,試劑耗材種類繁多。

小鼠活化素A(ACV-A)ELISA Kit 保溫在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí),產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng),在ELISA中一般不予采用。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng),操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書的要求控制溫育。室溫溫育時(shí),ELISA板只要平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。

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