一般來說,胰島素ELISA試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準確的,低于這個值因為與曲線是個“S“型結構有關
胰島素是由胰臟內的胰島β細胞受內源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質激素。胰島素是機體內降低血糖的激素,同時促進糖原、脂肪、蛋白質合成。外源性胰島素主要用來糖尿病治療。
一般來說,胰島素ELISA試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準確的,低于這個值因為與曲線是個“S"型結構有關,所以結果是有偏差的,是一種估算。再加上實驗誤差,所以達不到理想的效果。建議選擇試劑盒時,應該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
雖然酶活性調節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA中,檢測的靈敏度遠比RIA高。根據質量作用定律。即免疫反應所形成的免疫復合物量與反應物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,那么理論推測酶活性放大ELISA方法的zui低檢測限可達1.7×10-24mol/L。
雖然在實際應用中由于反應條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達不到這個水平(大于104個分子),但表明ELISA在靈敏度方面的改進潛力是很大的。
胰島素elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。