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數(shù)字PCR技術(shù)

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更新時間：2016-11-04 15:25:04瀏覽次數(shù)：2448次

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產(chǎn)品簡介

數(shù)字PCR即Digital PCR（dPCR），是繼一代普通PCR、二代熒光定量PCR之后的第三代PCR技術(shù)。相較于qPCR，數(shù)字PCR可直接數(shù)出DNA分子的個數(shù)，可以對起始樣品定量，是一種全新的核酸分子定量技術(shù)。

詳細(xì)介紹

一、服務(wù)介紹

數(shù)字PCR即Digital PCR（dPCR)，是繼一代普通PCR、二代熒光定量PCR之后的第三代PCR技術(shù)。相較于qPCR，數(shù)字PCR可直接數(shù)出DNA分子的個數(shù)，可以對起始樣品定量，是一種全新的核酸分子定量技術(shù)。

dPCR與qPCR方法相比，本方法無需核酸標(biāo)準(zhǔn)品，定量的結(jié)果不再依賴于 Ct 值；又兼具qPCR方法的優(yōu)點，且結(jié)果的精確度、準(zhǔn)確性和靈敏度更佳。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域：拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達(dá)研究（如等位基因不平衡表達(dá)）、二代測序結(jié)果驗證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等，在環(huán)境微生物和病原體基因的檢測、遺傳病、**、NGS數(shù)據(jù)驗證等方面將具有更廣闊的應(yīng)用前景。

二、實驗原理

通過把稀釋到一定濃度的DNA分子分布在一定數(shù)目的微滴中，使大部分微滴中的DNA分子數(shù)目為1或0，然后通過PCR擴(kuò)增和熒光信號的累計讀取陽性微滴數(shù)目，有熒光信號的微滴判讀為1；沒有熒光信號的微滴判讀為0，再根據(jù)泊松分布計算出樣本中的DNA分子數(shù)。