細(xì)胞：JF1細(xì)胞
中文名稱：大鼠肉瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
與胚胎干細(xì)胞相比，成體干細(xì)胞具有許多優(yōu)勢(shì)：
胚胎干細(xì)胞具有全能性和可以建系傳代等優(yōu)點(diǎn)，理論應(yīng)用前景廣闊。但實(shí)際上由于每個(gè)個(gè)體的主要組織相容性復(fù)合體(MHC)不同，同種異體胚胎干細(xì)胞及其分化組織細(xì)胞用于臨床會(huì)引起免疫排斥，因此基于胚胎干細(xì)胞的治療方案要求對(duì)患者進(jìn)行長(zhǎng)期免疫抑制劑治療或?qū)⒒颊叩脑煅到y(tǒng)和外來(lái)細(xì)胞形成嵌合體。
研究證實(shí)：人胚胎干細(xì)胞能誘導(dǎo)分化成為造血細(xì)胞，但小鼠胚胎干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)表明：
來(lái)源于胚胎干細(xì)胞的造血細(xì)胞在體內(nèi)無(wú)法重建造血機(jī)制，因而限制了臨床應(yīng)用。為了解決免疫排斥的問(wèn)題，研究人員探索將患者的體細(xì)胞核移植到去核的健康供體卵細(xì)胞中，在體外克隆并隨后發(fā)育分化產(chǎn)生攜帶患者自己MHC的胚胎干細(xì)胞。
這些胚胎干細(xì)胞及其衍生組織移植后不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥，因此可以用于患者病變組織及其功能的重建，這就是治療性克隆。
但一些研究觀察：胚胎干細(xì)胞發(fā)育分化過(guò)程中具有極_高的非整倍體發(fā)生率，克隆動(dòng)物的基因在構(gòu)成沒(méi)有缺陷的情況下，也不能像正常動(dòng)物基因一樣準(zhǔn)確表達(dá)出來(lái)。
BGC-823細(xì)胞 BGC823細(xì)胞胃腺癌細(xì)胞種屬：人
BV2細(xì)胞 膠質(zhì)細(xì)胞種屬:小鼠
CV-1細(xì)胞 CV1細(xì)胞 腎細(xì)胞 種屬：猴
正是這個(gè)原因，造成現(xiàn)在98%的動(dòng)物克隆實(shí)驗(yàn)失敗，而順利降生的克隆動(dòng)物也經(jīng)常出現(xiàn)體重超重等異常。研究還發(fā)現(xiàn)，利用目前的克隆技術(shù)取患者體細(xì)胞核的細(xì)胞克隆培育出來(lái)的新組織一樣會(huì)存在缺陷，這項(xiàng)技術(shù)還有待完善、成熟。
體細(xì)胞克隆所需的卵細(xì)胞難以獲得，成體干細(xì)胞則可從患者自身獲得，而不存在組織相容性的問(wèn)題，治療時(shí)可避免長(zhǎng)期應(yīng)用免疫抑制劑對(duì)患者的傷害。此外，少量的骨髓切除治療有助于形成部分造血嵌合，可使異體成體干細(xì)胞的治療成為可能。
