細(xì)胞：HEK293A細(xì)胞
中文名稱：人胚腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
將白細(xì)胞反分化成干細(xì)胞
將人體血液中被稱作單核細(xì)胞的白細(xì)胞置于特定的營(yíng)養(yǎng)劑和生長(zhǎng)因子中，促使其反分化為多能干細(xì)胞。
這種反分化而成的干細(xì)胞可以分化為多種組織細(xì)胞，包括腦細(xì)胞、肝細(xì)胞和生產(chǎn)胰島素的貝塔胰島細(xì)胞等，但并非像胚胎干細(xì)胞那樣可以分化為全部的組織細(xì)胞。生長(zhǎng)因子的不同組合能使反分化成的干細(xì)胞分化為不同細(xì)胞。
這項(xiàng)技術(shù)的原理是將患者自身的白細(xì)胞還原成干細(xì)胞，然后用化學(xué)方法促使其重新發(fā)展成特定組織，這些組織可用來(lái)治愈受損組織。這項(xiàng)技術(shù)的最_大優(yōu)勢(shì)在于，移植組織是由患者自身細(xì)胞轉(zhuǎn)變而來(lái)的，可從根本上杜絕排異反應(yīng)。
不過(guò)，絕大部分主流干細(xì)胞研究人員對(duì)此抱懷疑態(tài)度，因?yàn)橄駟魏思?xì)胞這樣的特殊細(xì)胞可以反分化還原出更為原始的干細(xì)胞的概念還不成熟。
但目前多數(shù)干細(xì)胞研究人員都專(zhuān)注于對(duì)胚胎干細(xì)胞的研究，忽視了成體細(xì)胞反分化的研究。造成這種現(xiàn)象的原因之一可能是胚胎干細(xì)胞更為“純凈”，而成體細(xì)胞因已受長(zhǎng)時(shí)間的遺傳損害，容易出現(xiàn)差錯(cuò)。
