細(xì)胞:HTR-8細(xì)胞
中文名稱:人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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脂肪或起源于筋膜組織
筋膜是一種無處不在而且連續(xù)分布的膜狀結(jié)締組織,具有很強的韌性,包裹、分隔、支持和連接體內(nèi)的各種器官及組織的表面與內(nèi)部。生活中所見肉類含的膜即是筋膜。
以往的研究表明,脂肪細(xì)胞從被稱為脂肪前體細(xì)胞的干細(xì)胞演化而來。長期以來,人們期望找到脂肪組織以外的脂肪干細(xì)胞,以解釋脂肪的起源。
采用不同年齡大鼠的淺筋膜組織,發(fā)現(xiàn)筋膜含有大量脂肪干細(xì)胞,能自發(fā)地或經(jīng)誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞。這些筋膜細(xì)胞表達(dá)一系列脂肪干細(xì)胞的標(biāo)志性分子,并且是已經(jīng)定向的脂肪前體細(xì)胞。
在出生后的發(fā)育成長過程中,筋膜血管周圍的脂肪前體細(xì)胞陸續(xù)分化為脂肪細(xì)胞,逐漸沿著血管形成二維的單層的脂肪細(xì)胞薄層;
隨后新生的微血管沿著脂肪細(xì)胞薄層向外、向前、向上方分枝延伸,其作用是繼續(xù)提供脂肪前體細(xì)胞、營養(yǎng)物質(zhì),刺激脂肪分化的激素和因子。
進(jìn)而,一些新生的脂肪細(xì)胞出現(xiàn)在原脂肪細(xì)胞薄層上方,并不斷向上、向外堆積生長,逐漸形成三維的脂肪組織。
此后,原有的筋膜組織依其固有的組織學(xué)特性,將自發(fā)延伸進(jìn)入剛形成的三維新生脂肪中,成為新生脂肪內(nèi)部的筋膜,并在脂肪組織內(nèi)繼續(xù)提供脂肪前體細(xì)胞,以保證新生脂肪組織的自我擴增。
筋膜是脂肪細(xì)胞起源的模型,揭示了脂肪組織從無到有、從單層到三維組織塊的動態(tài)發(fā)育過程,也解釋了脂肪組織的新生起源及隨后的自我擴增問題。