細(xì)胞:SK-HEP-1細(xì)胞
中文名稱:人肝腹水腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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小鼠卵巢內(nèi)存在雌性干細(xì)胞
經(jīng)典理論認(rèn)為哺乳動物出生時卵巢已形成了終生所需的原始卵泡,出生后沒有卵細(xì)胞的再生。然而,近來一些研究對經(jīng)典理論提出了質(zhì)疑,認(rèn)為卵 中可能存在干細(xì)胞及卵的再生。
但這些證據(jù)主要來自體外實驗(細(xì)胞培養(yǎng)及移植),無法說明生條件下體內(nèi)存在巢干細(xì)胞并發(fā)揮重要功能。
澄清體內(nèi)是否存在巢生 干細(xì)胞以及它們對巢功能維持的意義,將會革新人們對卵細(xì)胞發(fā)生過程的認(rèn)識。研究團(tuán)隊對這一爭議巨大的科學(xué)問題進(jìn)行了探討。
他們首先確定了成年小鼠(兩月齡)巢皮層中存在尚未形成卵泡的生細(xì)胞,其中有些細(xì)胞處于較原始未分化狀態(tài)(表達(dá)Oct4但不表達(dá)分化基因Dazl或Ddx4)。
隨后利用可控示蹤體系對表達(dá)Oct4的較原始的生細(xì)胞進(jìn)行了長達(dá)4個月的體內(nèi)標(biāo)記示蹤,持續(xù)觀察到一些YFP標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂并形成原始卵泡以及極少數(shù)YFP標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)行DNA復(fù)制和有絲分裂。