細(xì)胞：SK-N-MC細(xì)胞
中文名稱：人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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大腦是高度區(qū)域化的非常復(fù)雜的器官，但其各個(gè)區(qū)域在進(jìn)化過程中是如何獲得的，還不清楚。腦非常柔軟，很難形成化石留存，因此依靠絕滅初期的脊椎動(dòng)物(vertebrates)化石很難分析腦進(jìn)化情況。
現(xiàn)在地球上生息的脊椎動(dòng)物(vertebrates)分為有顎的“顎口類”動(dòng)物和無顎的“圓口類”動(dòng)物，它們?cè)?億年前走上不同的進(jìn)化道路。
因此，對(duì)它們的發(fā)育過程進(jìn)行比較，就能夠了解脊椎動(dòng)物(vertebrates)的初期進(jìn)化情況，認(rèn)識(shí)大腦的進(jìn)化變遷。
對(duì)“圓口類”動(dòng)物盲鰻和七鰓鰻的腦發(fā)育過程進(jìn)行了觀察。在開始的研究中，他們沒有發(fā)現(xiàn)七鰓鰻大腦基底核的一部分內(nèi)側(cè)基底核隆起
因此判斷其小腦尚未發(fā)達(dá)，這一區(qū)域是在“顎口類”動(dòng)物分化之后發(fā)育進(jìn)化的，或是在七鰓鰻進(jìn)化過程中二次退化。
而在對(duì)盲鰻的腦發(fā)育過程進(jìn)行觀察后，研究小組發(fā)現(xiàn)，在七鰓鰻腦內(nèi)未發(fā)現(xiàn)的內(nèi)側(cè)基底核隆起在盲鰻的胚胎中存在。而且他們還在稱為菱腦唇的小腦生成部位發(fā)現(xiàn)了構(gòu)成小腦的神經(jīng)元遺傳基因。
根據(jù)上述結(jié)果，研究人員對(duì)七鰓鰻胚胎重新進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)七鰓鰻也存在內(nèi)側(cè)基底核隆起和菱腦唇兩個(gè)區(qū)域。
