細(xì)胞：SK-MEL-2細(xì)胞
中文名稱：人皮膚惡性黑色素瘤細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
地球上所有的生物都依賴核糖體來合成蛋白質(zhì)，對于這個龐大復(fù)雜的分子機(jī)器來說，在機(jī)體內(nèi)要經(jīng)過高度復(fù)雜和動態(tài)的組裝過程才能形成，而且這種組裝-拆卸-再組裝的過程也是生物機(jī)體所必需的。
研究深入探索了與一種基因突變密切相關(guān)的神經(jīng)退行性病變過程，他們針對小鼠展開了研究，解析小鼠中樞刪減系統(tǒng)中神經(jīng)細(xì)胞死亡的過程。
研究發(fā)現(xiàn)一種用于重復(fù)回收核糖體的特殊蛋白的缺失，會導(dǎo)致蛋白合成停滯不前，引起小鼠中神經(jīng)細(xì)胞死亡。
進(jìn)一步探討這種缺失的蛋白是否會在另外不同的遺傳背景下引起同樣的問題。但這種蛋白的缺失只有在一種特定的遺傳背景下才能引起神經(jīng)細(xì)胞死亡，這表明核糖體相關(guān)的突變依賴于對其產(chǎn)生影響的另外一種基因。
經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)，研究最終發(fā)現(xiàn)了這第二個基因，即存在于大腦中的特殊tRNAs中的GTPBP2——tRNAs的作用是幫助DNA翻譯成蛋白。這種tRNA基因的突變會引起核糖體停止在一個特殊的DNA序列上，減慢蛋白合成過程。
由于這項(xiàng)研究采用的遺傳背景是用于構(gòu)建其他人類疾病模型，因此采用這種小鼠模型的研究人員也要多加注意。
