細胞:MADB106細胞
中文名稱:大鼠乳腺腺癌細胞系
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
揭示活細胞反應(yīng)過程以及細胞如何響應(yīng)化學(xué)信號的機制將有助于改進當(dāng)下針對已產(chǎn)生抗性的多種癌癥和其他細胞紊亂疾病的治療方法。
研究揭示了Ras蛋白家族活性機制。這一蛋白家族是細胞生物信號網(wǎng)絡(luò)的最重要組成部分之一,也是癌癥發(fā)展主要驅(qū)動因素。
活細胞的細胞信號網(wǎng)絡(luò)起始于位于細胞表面的受體蛋白,由這些蛋白檢測并與環(huán)境中的信號作用,之后受體將接受到的信號轉(zhuǎn)化為化學(xué)網(wǎng)絡(luò)。盡管胞內(nèi)信號網(wǎng)絡(luò)執(zhí)行的邏輯運算類似計算機微處理器,然而又有不同之處,即同樣的輸入會產(chǎn)生不一樣的結(jié)果。
Ras是膜錨定蛋白家族一員,其活性的激活是細胞信號傳導(dǎo)中關(guān)鍵步驟,其控制胞內(nèi)細胞增殖、分化和存活。
已知Ras基因的變異是發(fā)現(xiàn)的與人類癌癥相關(guān)的變異,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)約1/3的癌癥發(fā)生了Ras的錯誤激活現(xiàn)象。同時Ras信號的不正常也被認為是其他疾病例如糖尿病、免疫相關(guān)疾病和炎癥紊亂等的致病因子。
理解Ras信號作用的阻力在于如何通過SOS交換因子激活膜錨定蛋白Ras的重要作用,而SOS活性又通過該蛋白和膜的相互作用調(diào)節(jié)構(gòu)象。
這一相互關(guān)系的認識當(dāng)前是通過細胞生物學(xué)研究推斷出來而非直接觀察的結(jié)果。為更好理解通過SOS調(diào)控Ras活性的機制,研究需要在膜上直接觀察每個SOS分析與Ras的作用。然后,從膜環(huán)境來研究歷來一直是個挑戰(zhàn)。