細(xì)胞：HePa1-6細(xì)胞
中文名稱：小鼠肝癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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對(duì)單細(xì)胞內(nèi)的單個(gè)脂滴進(jìn)行了分析。一種叫做拉曼譜學(xué)顯微術(shù)(Raman spectromicroscopy)的分析工具，使得能夠?qū)罴?xì)胞和小鼠中的單個(gè)脂滴進(jìn)行成分分析。
癌細(xì)胞需要脂滴儲(chǔ)存庫(kù)。而我們的成像數(shù)據(jù)出人意料地揭示出在高級(jí)別前列腺癌和轉(zhuǎn)移灶的脂滴中有異常膽固_醇酯累積。
研究發(fā)現(xiàn)膽固_醇酯只在晚期前列腺癌和轉(zhuǎn)移灶中發(fā)生累積，這是由于腫瘤抑制基因PTEN喪失和一條促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的細(xì)胞內(nèi)代謝信號(hào)通路活化所致。
這些研究結(jié)果增進(jìn)了當(dāng)前對(duì)于膽固_醇在癌癥中所起作用的理解，也為診斷和治療侵襲性前列腺癌指出了一些新機(jī)會(huì)。研究結(jié)果還表明，一類從前開發(fā)出來(lái)治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物或許可以用于治療晚期前列腺癌。
這些研究發(fā)現(xiàn)有可能帶來(lái)新的前列腺癌診斷和治療方法。藥物avasimibe和Sandoz 58-035可以減少實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)物和異種移植物小鼠模型中的膽固_醇酯累積，顯著抑制晚期前列腺癌生長(zhǎng)。這些藥物對(duì)動(dòng)物未顯示毒性。
注意到avasimibe、Sandoz 58-035和一類相似藥物被開發(fā)出來(lái)用于治療動(dòng)脈粥樣硬化，然而由于不能有效地減小血小板的大小臨床試驗(yàn)被終止。本研究突顯了可重新利用這些藥物來(lái)治療晚期前列腺癌。
