細胞:SK-MEL-1細胞
中文名稱:人皮膚黑色素瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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在干細胞成為血液細胞的過程中(該過程稱為造血作用),發(fā)現(xiàn)以前未被發(fā)現(xiàn)的步驟。了解血液疾病,識別血液細胞類型之間的基因表達的成千上萬的差異。
這些差異導致了許多特定事件,這些事件在血液正常發(fā)育中起著至關(guān)重要的作用。在這個過程中出錯可能會導致血液疾病,包括白血病。
生成轉(zhuǎn)錄因子和其他蛋白質(zhì)調(diào)控這個復雜過程的綜合目錄。這項研究發(fā)現(xiàn),RNA在造血過程中以不同的方式被剪切并粘貼到一起,導致每一個階段的蛋白特定形式。
直至本研究,血細胞生成在DNA的水平上有了比較充分的了解。不知道的是,然后DNA上的遺傳信息是如何轉(zhuǎn)錄生成RNA,導致蛋白的形成。、
已經(jīng)確定了上千個新的RNA被另一種方式處理的位點,在血細胞發(fā)育的RNA的可變剪接的關(guān)鍵重要性是,通過研究兩種不同形式的同種轉(zhuǎn)錄因子在巨核細胞(血小板的的前體細胞)形成中的作用來說明的。
這樣的事件改變了來源于單一基因的蛋白質(zhì)的數(shù)量,結(jié)構(gòu)和行為。替代蛋白可促進干細胞轉(zhuǎn)化為不同的成熟血細胞。
這項研究所需的造血干細胞和其他細胞沒有被先前的人們研究的很詳細,是因為它們在成人的骨髓中極為罕見。埃伯教授說:“在這項研究中,我們能夠從捐贈的臍帶血中純化出這些細胞,這些祖細胞在臍帶血中的濃度高得驚人。”
這項研究成果對患有血液疾病的病人有著重大應用??梢蚤_始設計血液疾病(包括白血病)的診斷和新療法。它們將在未來的干細胞移植治療,再生醫(yī)學以及發(fā)現(xiàn)罕見的遺傳性血液病及免疫疾病的遺傳基礎中有著很大的價值。