細(xì)胞:RM-1細(xì)胞
中文名稱:小鼠前列腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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建立了一個(gè)從停止自然生長(zhǎng)的人體胚胎中提取干細(xì)胞的體系,也就是從“死亡”胚胎中提取干細(xì)胞,以減輕可能面對(duì)的道德倫理爭(zhēng)議。
研究集中于132個(gè)“死亡”胚胎,它們?cè)诘诌_(dá)不同的研究平臺(tái)之前24或48小時(shí)停止細(xì)胞分裂。
其中的13個(gè)胚胎在細(xì)胞分裂停止前達(dá)到了16到24個(gè)細(xì)胞,比其他的胚胎要多。但只能從這些胚胎中的一個(gè)取得一條干細(xì)胞線索。這些干細(xì)胞在經(jīng)歷一系列檢測(cè)后正常履行了它們的功能。
不知道這個(gè)結(jié)果是否能消除干細(xì)胞培植的倫理爭(zhēng)議。這項(xiàng)研究試圖證明這樣的胚胎能提供健康胚胎所不 能提供的細(xì)胞源,而不是進(jìn)行什么技術(shù)競(jìng)賽。
科技的發(fā)展能使得提取干細(xì)胞不再像器官捐獻(xiàn)那樣備受爭(zhēng)議。但是,其他人認(rèn)為仍然存在很多技術(shù)和倫理問題。提取的這些干細(xì)胞來自只有幾天生命的人體胚胎,并且提取過程會(huì)破壞胚胎,這點(diǎn)正是道德爭(zhēng)端所在。