細胞：PIEC細胞
中文名稱：豬髖動脈內皮細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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胚胎干細胞的研究進展
在體外,ES可以被無限期地培養(yǎng),并分化成多種類型的細胞,為細胞替代治療提供用之不竭的來源。由于涉及到倫理問題,目前胚胎干細胞的研究還限于動物試驗。
有學者已成功建立小鼠ES細胞系,并誘導出了神經(jīng)膠質細胞、心肌細胞和肝細胞。
目前,體細胞核轉移(SCNT)是一項倍受矚目的技術,將供體卵細胞去核后,植入患者體細胞核,假孕發(fā)育成囊胚,建立受者免疫耐受的ES細胞系,誘導分化成特定細胞后再進行移植。
在對骨髓干細胞和胚胎干細胞進行大規(guī)模臨床應用之前,還需通過大量工作建立完善的技術體系,以獲得大量純化、穩(wěn)定和成熟的細胞。另外,還要闡明干細胞的遺傳和生物學表型特征,確定免疫逃逸和無腫瘤形成,評估其療效、副作用和危險性。
在另一方面,通過對造血系腫瘤的研究發(fā)現(xiàn),腫瘤細胞的生長繁殖與干細胞之間有許多驚人的相似之處,因此提出了腫瘤的干細胞學說,為探索腫瘤的發(fā)生機制和腫瘤的預防治療提出了新的思路和方向。
