細(xì)胞：NR8383細(xì)胞
中文名稱：大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：F12K+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
骨髓干細(xì)胞的應(yīng)用前景
哺乳動(dòng)物的干細(xì)胞主要分為全能干細(xì)胞[即胚胎干細(xì)胞(ES)]、多能干細(xì)胞(包括骨髓來(lái)源干細(xì)胞)和組織特異性干細(xì)胞。
骨髓干細(xì)胞能夠分化為多種組織細(xì)胞,如肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞等,以修復(fù)病變和損傷的組織,而且自體骨髓干細(xì)胞能避免移植后免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生。
通過(guò)與轉(zhuǎn)基因技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用,干細(xì)胞還能用于治療包括艾滋病在內(nèi)的許多自身免疫性疾病。
目前自體骨髓干細(xì)胞移植已進(jìn)入小規(guī)模人體試驗(yàn)階段,開(kāi)展了對(duì)骨損傷和缺損、心肌梗死、肝功能衰竭的再生治療,結(jié)果令人鼓舞,但長(zhǎng)期療效還有待進(jìn)一步確定。
目前,存在的主要問(wèn)題包括:
①如何大量擴(kuò)增干細(xì)胞;
?、诜歉杉?xì)胞的有核細(xì)胞在其中發(fā)揮的作用;
?、鄹杉?xì)胞的作用機(jī)制。
同種異體骨髓干細(xì)胞移植的臨床需求較高,特別是在脊髓損傷和心肌梗死等緊急情況下。另外,有研究表明,骨髓干細(xì)胞能夠抑制T細(xì)胞增殖和成熟,有免疫特權(quán)。
