細(xì)胞:A-204細(xì)胞
中文名稱:人橫紋肌肉瘤細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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干細(xì)胞僅限于功能上的定義, 而沒有形態(tài)學(xué)和表型上存在的證據(jù)。干細(xì)胞可以自我更新, 繁殖產(chǎn)生更多的干細(xì)胞, 同時(shí)也可以分化成各種各樣的祖細(xì)胞,
后者又可進(jìn)一步成熟發(fā)展成許多有特定功能的細(xì)胞系。干細(xì)胞這種功能特性極大地吸引了來自基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的研究者。
這些關(guān)于干細(xì)胞的基本功能給基礎(chǔ)科學(xué)的研究者們提供了一種模式, 利用這種模式,他們可以從細(xì)胞的原始階段來研究發(fā)展生物學(xué)。干細(xì)胞所具有的修復(fù)、替代和再生的能力也為臨床醫(yī)學(xué)提供了一個(gè)發(fā)展新療法的機(jī)會。
鑒定:因?yàn)楦杉?xì)胞僅僅是通過其具有的功能所定義的,所以鑒定和分離這類獨(dú)_特的細(xì)胞群將會成為一種非常具有挑戰(zhàn)性的工作。
胚胎干細(xì)胞(ES,一種從著床前的胚胎內(nèi)細(xì)胞群中得到的一種細(xì)胞)被認(rèn)為是有多能性的一類干細(xì)胞。
隨著人多能胚胎干細(xì)胞系和胚胎shengzhi細(xì)胞系的成功建立,這一領(lǐng)域成為熱點(diǎn)。這些細(xì)胞可以在體外環(huán)境下無限制的、無差別的增殖下去,而且還能保留著向許多方向分化的能力。
盡管胚胎干細(xì)胞有很大的發(fā)展?jié)摿?但是圍繞著來源于胚胎的細(xì)胞及組織的倫理學(xué)爭論還是將其從試驗(yàn)和應(yīng)用領(lǐng)域排除出去了。因此,成人干細(xì)胞將會成為未來治療手段。