細(xì)胞:SK-LU-1細(xì)胞
中文名稱:人低分化肺腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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在細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(CKI)p27或p21基因敲除的小鼠中發(fā)現(xiàn),p21和p27分別作用于細(xì)胞周期G1晚期和S期,可調(diào)節(jié)干細(xì)胞休止和再生能力;
去除G1早期的抑制物p18,可增加造血干細(xì)胞增殖能力,并且明顯增加了干細(xì)胞的自我更新能力。
進一步研究發(fā)現(xiàn),CKI介導(dǎo)的細(xì)胞周期調(diào)控也存在于神經(jīng)干細(xì)胞中,提示CKI在其他組織干細(xì)胞周期調(diào)控中也扮演著至關(guān)重要的角色。
這些研究為干/祖細(xì)胞特異性細(xì)胞周期調(diào)控提供了新的靶向,也為體外干細(xì)胞的誘導(dǎo)、分化提供了新的線索。
科研人員進行了干細(xì)胞分化調(diào)控新基因的篩選及其功能研究。他們利用抑制性消減雜交技術(shù)(SSH)構(gòu)建了Lin-CD34-和Lin-CD34+細(xì)胞的差異表達(dá)基因的cdna文庫,發(fā)現(xiàn)了Humanin基因,該基因?qū)ι窠?jīng)細(xì)胞的凋亡具有保護作用,在髓系造血祖細(xì)胞K562中具有延緩凋亡和抑制分化的作用,在Lin-CD34-細(xì)胞中的高表達(dá)提示該基因可能參與造血干細(xì)胞自我更新能力的維持。
他們克隆并命名的人新基因Spindlin1(AF317228)可能參與人胚胎的早期發(fā)育,有可能在腫瘤的發(fā)生中發(fā)揮重要作用。
目前,他們正對人10號染色體長臂上的兩個新基因——N-RAP和MOB進行克隆與功能研究。這些研究可以使人們獲得越來越多的與干細(xì)胞增殖與分化過程相關(guān)的新的功能基因,對這些基因的深入研究將有助于闡明干細(xì)胞增殖與分化的調(diào)控機制。(人MDA-MB-134Ⅵ細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人乳導(dǎo)管癌細(xì)胞
人H2087細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞)
ASC移植的總體目標(biāo)是建立ASC增殖和誘導(dǎo)分化的技術(shù)平臺,獲得大量多能或組織干細(xì)胞,用于相關(guān)病人的移植治療,相信隨著研究的不斷深入,干細(xì)胞移植治療多種疾病將不再是一個夢想!