細胞:MKN-45細胞
中文名稱:人胃癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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干細胞培育環(huán)境影響干細胞分化
研究證實干細胞會對它們的物理環(huán)境做出響應,一些研究表明轉(zhuǎn)錄輔激活因子YAP和TAZ將來自環(huán)境的這一機械信息傳導給了細胞。檢測了干細胞能否“記住”過去的環(huán)境,以及這種記憶對于它們命運的影響。
在一組試驗中,研究首先將細胞置于堅硬的聚苯乙烯表面培養(yǎng),然后將它們轉(zhuǎn)移到一層軟凝膠上,研究發(fā)現(xiàn)在硬基底上培養(yǎng)的細胞長得更長,促成骨轉(zhuǎn)錄因子RUNX2表達更高。
(人SK-N-SH細胞 來源:通派細胞庫 人神經(jīng)母細胞瘤細胞)
為了了解這是否會轉(zhuǎn)化為偏向骨細胞命運,將培養(yǎng)于軟表面和硬表面的細胞進行了比較。兩種細胞群都培養(yǎng)于成脂和成骨培養(yǎng)基中。在軟環(huán)境中的細胞顯示出向脂肪或骨細胞譜系發(fā)展的跡象。相比之下,轉(zhuǎn)移到較軟表面之前在硬表面上培育較長時間的細胞更傾向于成骨細胞命運。
(人SK-HEP-1細胞 來源:通派細胞庫 人肝腹水腺癌細胞)
研究表明人類間充質(zhì)細胞附著凝膠的硬度與細胞定型的某些標記物之間存在著一些關(guān)聯(lián)。細胞似乎記住了它們過去在硬底物上的經(jīng)歷。研究將干細胞培育在光可調(diào)凝膠上,并讓細胞在硬凝膠上培養(yǎng)不同的天數(shù)。
(人SK-NEP-1細胞 來源:通派細胞庫 人腎母細胞瘤細胞)