2018 05-03

血細(xì)胞分離技術(shù)

采血（一）材料與試劑1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止*原轉(zhuǎn)化為*，進(jìn)而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml，市售肝...

2018 04-27

細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)---瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

細(xì)胞常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（*轉(zhuǎn)染）。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染（transienttransfection）是將DNA導(dǎo)入真核細(xì)胞的方式之一。在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中，重組DNA導(dǎo)入感染性強(qiáng)的細(xì)...

2018 04-24

動物組織中DNA的制備

DNA是所有生物體的基本組成物質(zhì)。真核生物DNA主要存在于細(xì)胞核中。制備DNA時(shí)應(yīng)將細(xì)胞核膜打破方能釋放出來。細(xì)胞中的DNA和RNA分別與蛋白質(zhì)相結(jié)合，形成脫氧核糖核蛋白及核糖核蛋白。在細(xì)胞破碎后，這...

2018 04-20

造血干細(xì)胞的用途

造血干細(xì)胞（Hematopoieticstemcell，HSC）是指骨髓中的干細(xì)胞，具有自我更新能力并能分化為各種血細(xì)胞前體細(xì)胞，zui終生成各種血細(xì)胞成分，包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板，它們也可以分化...

2018 04-16

生物實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)細(xì)胞常用的固定劑和固定方法

生物實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)細(xì)胞的步驟至關(guān)重要，江蘇菲亞生物科技的研究人員通過每次的實(shí)驗(yàn)總結(jié)出培養(yǎng)細(xì)胞常用的固定劑和固定方法。常用的培養(yǎng)細(xì)胞常用固定劑有4％多聚甲醛磷酸緩沖液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用...

2018 04-03

抗血清的制備過程

抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清，一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。價(jià)的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療?？寡宓闹苽溥^程：一、材料：1、金屬編號牌（對動物作標(biāo)記錄...

2018 03-28

Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)---間接法測抗體的操作步驟

Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的間接法是檢測抗體zui常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：⑴Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗...

2018 03-23

簡述ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

科研實(shí)驗(yàn)中許多試劑檢測都涉及標(biāo)準(zhǔn)曲線的問題，ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，每一步看似簡單的步驟都會影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，標(biāo)準(zhǔn)曲線做得好與壞會直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗，下面簡述幾點(diǎn)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線...

2018 03-22

ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意什么

一、防揮發(fā)1．油封：氨水，濃鹽酸，等易揮發(fā)無機(jī)液體，在液面上滴10～20滴礦物油，可以防止揮發(fā)（不可用植物油）。2．水封：二硫化碳中加5mL水，便可長期保存。汞上加水，可防汞蒸氣進(jìn)入空氣。汞旁放些硫粉...

2018 03-19

牛血清白蛋白的成分結(jié)構(gòu)與用途

牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一種球蛋白，包含607個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.446kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分（38g/...

2018 03-14

培養(yǎng)基種類的分配及其優(yōu)缺點(diǎn)

培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要，添加一些自身無法合成的化合物，即生長...

2018 03-09

牛血清白蛋白的作用

牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一種球蛋白，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在westernblot中作為Blocki...

2018 03-08

生物科研實(shí)驗(yàn)---ELISA實(shí)驗(yàn)中緩沖溶液的配置

生物科研實(shí)驗(yàn)---Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)。ELISA試劑以及各種溶液如何配置，江蘇菲亞生物現(xiàn)將把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢篍lisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中各種緩沖溶液的歸總：...

2018 03-07

細(xì)胞技術(shù)及活力測定

一、原理培養(yǎng)的細(xì)胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好，所以要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)結(jié)果以每毫升細(xì)胞數(shù)表示。細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理和方法與血細(xì)胞計(jì)數(shù)相同。在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞，總細(xì)胞中活...

2018 03-06

單酶或多酶偶聯(lián)反應(yīng)檢測方法

單酶反應(yīng)檢測利用單酶與底物反應(yīng)，然后用各種方法檢測出反應(yīng)前后物質(zhì)的變化情況，從而確定底物的量。這是zui簡單的酶法檢測技術(shù)。以*脫羧酶為例，L-*脫羧酶專一地催化L-*脫羧生成γ-氨基丁酸和二氧化碳，...

2018 03-01

羥基磷灰石填料-分離機(jī)理

羥基磷灰石填料——純化蛋白、多肽、核酸分離機(jī)理：羥基磷灰石具有*的分離機(jī)理，是*直接用于蛋白質(zhì)和核酸純化的無機(jī)層析填料，高度耐堿，生物安全性zui高。其中磷酸離子與帶正電的蛋白質(zhì)以離子鍵結(jié)合，具有離子...

2018 02-28

江蘇菲亞生物胎牛血清-主要技術(shù)指標(biāo)

目前國內(nèi)血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是2005版的《中華人民共和國藥典》，主要指標(biāo)有以下幾點(diǎn)：1、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分，因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的...

2018 02-26

原代細(xì)胞的分離和制作的消化分離法的操作步驟

（1）剪切把組織塊剪碎，呈1~5mm3大小的組織塊。（2）加液漂洗將碎組織塊在平皿（或三角燒瓶）中用無鈣鎂PBS洗2-3次（采用傾斜，自然沉降法）。（3）消化加入消化液（*或膠原酶或EDTA）于37℃...

2018 02-08

細(xì)胞培養(yǎng)的天然培養(yǎng)基是什么

牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能，具體功能如下：1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)...

2018 01-03

人ELISA試劑盒具體操作

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人性別決定區(qū)Y框蛋白9(SOX9)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。操作步驟1、加...