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上海永葉生物科技有限公司

微生物的培養(yǎng)

時(shí)間:2015-6-8閱讀:236
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微生物的生長(zhǎng),除了受本身的遺傳特性決定外,還受到許多外界因素的影響,如營(yíng)養(yǎng)物濃度、溫度、水分、氧氣、PH等。微生物的種類(lèi)不同,培養(yǎng)的方式和條件也不盡相同。

1、影響微生物生長(zhǎng)的因素:微生物的生長(zhǎng),除了受本身的遺傳特性決定外,還受到外界許多因素的影響。影響微生物生長(zhǎng)的因素很多,簡(jiǎn)要介紹如下。

1) 營(yíng)養(yǎng)物濃度 

細(xì)菌的生長(zhǎng)率與營(yíng)養(yǎng)物的濃度有關(guān):μ=μmax*C/(K+C) 

營(yíng)養(yǎng)物濃度與生長(zhǎng)率的關(guān)系曲線是典型的雙曲線。

K值是細(xì)菌生長(zhǎng)的很基本的特性常數(shù)。它的數(shù)值很小,表明細(xì)菌所需要的營(yíng)養(yǎng)濃度非常之低,所以在自然界中,它們到處生長(zhǎng)。然而營(yíng)養(yǎng)太低時(shí),細(xì)菌生長(zhǎng)就會(huì)遇到困難,甚至還會(huì)死亡。這是因?yàn)槌松L(zhǎng)需要能量以外,細(xì)菌還需要能量來(lái)維持它的生存。這種能量稱(chēng)為維持能。另一方面,隨著營(yíng)養(yǎng)物濃度的增加,生長(zhǎng)率愈接近zui大值。

2)溫度

在一定的溫度范圍內(nèi),每種微生物都有自已的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn):zui低生長(zhǎng)溫度、zui適生長(zhǎng)溫度和zui高生長(zhǎng)溫度。在生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)內(nèi),微生物都能生長(zhǎng),但生長(zhǎng)速率不一樣。微生物只有處于zui適生長(zhǎng)溫度時(shí),生長(zhǎng)速度才zui快,代時(shí)zui短。超過(guò)zui低生長(zhǎng)溫度,微生物不會(huì)生長(zhǎng),溫度太低,甚至?xí)劳?。超過(guò)zui高生長(zhǎng)溫度,微生物也要停止生長(zhǎng),溫度過(guò)高。也會(huì)死亡。一般情況下,每種微生物的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)是恒定的。但也常受其它環(huán)境條件的影響而發(fā)生變化。

根據(jù)微生物zui適生長(zhǎng)溫度的不同,可將它們分為三個(gè)類(lèi)型:

a.嗜冷微生物:其是適生長(zhǎng)溫度多數(shù)在-10℃-20℃之間

b.中溫微生物:其zui適生長(zhǎng)溫度一般在20℃-45℃之間

c.嗜熱微生物:生長(zhǎng)溫度在45℃以上。

3)水分

水分是微生物進(jìn)行生長(zhǎng)的必要條件。芽孢、孢子萌發(fā),首先需要水分。微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生長(zhǎng),而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長(zhǎng)發(fā)育的水分活性范圍內(nèi),均具有狹小的適當(dāng)?shù)乃只钚詤^(qū)域。

4)氧氣:按照微生物對(duì)氧氣的需要情況,可將它們分為以下五個(gè)類(lèi)型。

a.需氧微生物

這類(lèi)微生物需要氧氣供呼吸之用。沒(méi)有氧氣,便不能生長(zhǎng),但是高濃度的氧氣對(duì)需氧微生物也是有毒的。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長(zhǎng)。絕大多數(shù)微生物都屬于這個(gè)類(lèi)型。

b.兼性需氧微生物

這類(lèi)微生物在有氧氣存在或無(wú)氧氣存在情況下,都能生長(zhǎng),只不過(guò)所進(jìn)行的代謝途徑不同罷了。在無(wú)氧氣存在的條件下,它進(jìn)行發(fā)酵作用,例如酵母菌的無(wú)氧乙醇發(fā)酵。

c.微量需氧微生物

這類(lèi)菌是需要氧氣的,但只在0.2大氣壓下生長(zhǎng)。這可能是由一它們含有在強(qiáng)氧化條件下失活的酶,因而只有在低壓下作用。

d.耐氧微生物

這類(lèi)微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中,不需要氧氣,但也不怕氧氣存在,不會(huì)被氧氣所殺死。

c.厭氧微生物

這類(lèi)微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中,不需要分子氧。分子氧存在對(duì)它們生長(zhǎng)產(chǎn)生毒害,不是被抑制,就是被殺死。

2、培養(yǎng)方法

1)根據(jù)培養(yǎng)時(shí)是否需要氧氣,可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩大類(lèi)。

好氧培養(yǎng):也稱(chēng)“好氣培養(yǎng)"。就是說(shuō)這種微生物在培養(yǎng)時(shí),需要有氧氣加入,否則就不能生長(zhǎng)良好。在實(shí)驗(yàn)室中,斜面培養(yǎng)是通過(guò)棉花塞從外界獲得無(wú)菌的空氣。三角燒瓶液體培養(yǎng)多數(shù)是通過(guò)搖床振蕩,使外界的空氣*地進(jìn)入瓶中。

厭氧培養(yǎng):也稱(chēng)“厭氣培養(yǎng)"。這類(lèi)微生物在培養(yǎng)時(shí),不需要氧氣參加。在厭氧微生物的培養(yǎng)過(guò)程中,zui重要的一點(diǎn)就是要除去培養(yǎng)基中的氧氣。一般可采用下列幾種方法:

a.降低培養(yǎng)基中的氧化還原電位:常將還原劑如*、硫基醋酸鹽等,加入到培養(yǎng)基中,便可達(dá)到目的。有的將一些動(dòng)物的死的或活的組織如牛心、羊腦加入到培養(yǎng)基中,也可適合厭氧菌的生長(zhǎng)。

b.化合去氧:這也有很多方法,主要有:用焦性沒(méi)食子酸吸收氧氣;用磷吸收氧氣;用好氧菌與厭氧混合培養(yǎng)吸收氧氣;用植物組織如發(fā)芽的種子吸收氧氣;用產(chǎn)生氫氣與氧化合的方法除氧。

c.隔絕阻氧:深層液體培養(yǎng);用石蠟油封存;半固體穿刺培養(yǎng)。

d.替代驅(qū)氧 用二氧氣碳驅(qū)代氧氣;用氮?dú)怛?qū)代氧氣;用真空驅(qū)代氧氣;用氫氣驅(qū)代氧氣;用混和氣體驅(qū)代氧氣。

2)根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài),可分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩大類(lèi)。

固質(zhì)培養(yǎng):是將菌種接至疏松而富有營(yíng)養(yǎng)的固體培養(yǎng)基中,在合適的條件下進(jìn)行微生物培養(yǎng)的方法。

液體培養(yǎng):在實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)液體培養(yǎng)可以使微生物迅速繁殖,獲得大量的培養(yǎng)物,在一定條件下,還是微生物選擇增菌的有效方法。

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