研究人員近日開發(fā)出一種全基因組范圍的測序分析,可定位DNA切除修復。
當紫外線或其他一些物質造成基因組損傷時,此位點的一些DNA片段被切下,隨后與TFIIH蛋白結合。利用與酶結合的抗體,研究人員能夠分離出DNA片段-蛋白質復合物,并將它們拉出細胞,進行測序。然后研究人員能夠將片段定位回基因組中,顯示DNA修復發(fā)生在哪個位置。
據研究人員介紹,對于細胞中兩種類型的UV誘導損傷:環(huán)丁烷嘧啶二聚體和嘧啶-嘧啶酮光產物,XR-seq能夠產生核苷酸分辨率的修復圖譜。他們發(fā)現(xiàn),在野生型細胞中,CPD修復是與轉錄高度相關的,特別是模板鏈。
研究表明,細胞中不編碼蛋白質的DNA調控區(qū)域也被修復。此外,研究人員表示,這種分析也能發(fā)現(xiàn)癌細胞中修復DNA損傷的特定機制。如今,DNA損傷修復的研究已成為熱點。
研究介紹了利用測序方法來檢測DNA中的雙鏈斷裂,包括基因組編輯的核酸酶所產生的。這種被稱為GUIDE-seq的方法利用一種短雙鏈寡核苷酸來標記CRISPR-Cas誘導的脫靶斷裂,測序這些標簽所在的基因組區(qū)域,就能夠確定脫靶突變的位置。
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