研究人員近日開發(fā)出一種全基因組范圍的測(cè)序分析，可定位DNA切除修復(fù)。

當(dāng)紫外線或其他一些物質(zhì)造成基因組損傷時(shí)，此位點(diǎn)的一些DNA片段被切下，隨后與TFIIH蛋白結(jié)合。利用與酶結(jié)合的抗體，研究人員能夠分離出DNA片段-蛋白質(zhì)復(fù)合物，并將它們拉出細(xì)胞，進(jìn)行測(cè)序。然后研究人員能夠?qū)⑵味ㄎ换鼗蚪M中，顯示DNA修復(fù)發(fā)生在哪個(gè)位置。

據(jù)研究人員介紹，對(duì)于細(xì)胞中兩種類型的UV誘導(dǎo)損傷：環(huán)丁烷嘧啶二聚體和嘧啶-嘧啶酮光產(chǎn)物，XR-seq能夠產(chǎn)生核苷酸分辨率的修復(fù)圖譜。他們發(fā)現(xiàn)，在野生型細(xì)胞中，CPD修復(fù)是與轉(zhuǎn)錄高度相關(guān)的，特別是模板鏈。

研究表明，細(xì)胞中不編碼蛋白質(zhì)的DNA調(diào)控區(qū)域也被修復(fù)。此外，研究人員表示，這種分析也能發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞中修復(fù)DNA損傷的特定機(jī)制。如今，DNA損傷修復(fù)的研究已成為熱點(diǎn)。

研究介紹了利用測(cè)序方法來檢測(cè)DNA中的雙鏈斷裂，包括基因組編輯的核酸酶所產(chǎn)生的。這種被稱為GUIDE-seq的方法利用一種短雙鏈寡核苷酸來標(biāo)記CRISPR-Cas誘導(dǎo)的脫靶斷裂，測(cè)序這些標(biāo)簽所在的基因組區(qū)域，就能夠確定脫靶突變的位置。