2011 09-08

生物圖像處理的基本術(shù)語和常用參數(shù)

一.像素與灰度1．像素是構(gòu)成顯示器圖像的zui基本單元，按行和列（X和Y）方向排列成矩列。任何一矩列均對應(yīng)一個(gè)點(diǎn)，這些點(diǎn)稱為像素。單位面積屏幕上像素愈多則圖像愈清晰，即分辨率愈高，顯示的圖像也越細(xì)膩和...

2011 09-05

原位雜交結(jié)合免疫組織化學(xué)技術(shù)

原位雜交結(jié)合免疫組織化學(xué)技術(shù)主要用于在同一細(xì)胞內(nèi)同時(shí)或先后檢測特定基因在核酸和蛋白質(zhì)或多肽水平的表達(dá)，這樣不僅能了解基因表達(dá)，而且還能研究某種基因表達(dá)的翻譯和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。如果免疫組織化學(xué)檢測的抗原成分是...

2011 08-31

自動(dòng)化的ELISA技術(shù)

在一般的概念里，ELISA技術(shù)的可操作性強(qiáng)，不需復(fù)雜設(shè)備，甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果，便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對質(zhì)量控制意識的加強(qiáng)，盡可能做到zui低限度的減少系統(tǒng)誤差，以及減少勞動(dòng)強(qiáng)度...

2011 08-29

125I標(biāo)記物的鑒定方法

1．放射化學(xué)純度是指單位標(biāo)記物中結(jié)合于被標(biāo)記物上的放射性占總放射性的百分率，一般要求大于95%。常用的測定方法是利用三氯醋酸將待測樣品中（預(yù)加白蛋白助沉淀）所有蛋白質(zhì)沉淀，離心后測定沉淀物（標(biāo)記物）的...

2011 08-24

外源凝集素技術(shù)

外源凝集素（lectin）又稱植物凝集素、凝集素或選擇素，是廣泛存在于動(dòng)植物細(xì)胞內(nèi)的一種糖蛋白成分，是機(jī)體中除抗體和酶之外的第三類具有識別作用的蛋白質(zhì)，它可與某一特定細(xì)菌發(fā)生特異性結(jié)合，從而對細(xì)菌具有...

2011 08-22

化學(xué)試劑的等級

根據(jù)化學(xué)試劑的純度，按雜質(zhì)含量的多少可分為四級：一級試劑為純試劑，通常用G·R表示；二級試劑為分析純試劑，通常用A·R表示；三級試劑為化學(xué)純試劑，通常用C·R表示；四級試劑為實(shí)驗(yàn)或工業(yè)試劑，通常用L·...

2011 08-17

Western Blot

【實(shí)驗(yàn)原理】一個(gè)基因表達(dá)*結(jié)果是產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)（或酶）。因此檢測蛋白質(zhì)是測定基因表達(dá)的主要標(biāo)志，檢測蛋白質(zhì)的方法很多，除ELISA法外，也可用與檢測DNA和RNA相類似的吸印方法。前兩法有“南”和“...

2011 08-15

電子顯微鏡待檢樣品的制備

一、電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的主要區(qū)別顯微鏡的分辨率取決于所用光的波長，1933年開始出現(xiàn)的電子顯微鏡正是由于使用了波長比可見光短得多的電子束作為光源，使其所能達(dá)到的分辨率較光學(xué)顯微鏡大大提高。而光源的...

2011 08-05

怎么獲得染料法熒光PCR的可靠數(shù)據(jù)

染料法熒光PCR的數(shù)據(jù)與探針法的相比，除了擴(kuò)增曲線之外，還增加了熔解曲線分析。如何確定數(shù)據(jù)是好是壞？好的話，數(shù)據(jù)可以使用；壞的話，需要查明原因，擬定下一步的體系優(yōu)化方案。這里探討如何確定數(shù)據(jù)是好是壞，...

2011 08-02

初步分析IHC實(shí)驗(yàn)結(jié)果不好的原因

當(dāng)拿到一種商品化抗體，或自己制備的一抗或贈送的一抗，一般可根據(jù)如下原則處理：①、尋找信息；②、如無任何信息，可先不經(jīng)任何前處理用于IHC檢測；③、如未經(jīng)處理的染色結(jié)果呈陰性或不理想陽性結(jié)果，可用酶消化...

2011 07-28

化學(xué)合成Oligo知識

Oligo在分子生物學(xué)研究、臨床診斷和藥物治療方面很重要，而對于實(shí)驗(yàn)成功與否，選擇適當(dāng)?shù)姆椒兓疧ligo其實(shí)是十分關(guān)鍵的。一、為什么要純化？Oligo有機(jī)化學(xué)原理是利用結(jié)合于固相載體（CPG）上的核...

2011 07-26

神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)用的各種基質(zhì)

培養(yǎng)細(xì)胞的*培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如MEM）和添加劑（如血清或無血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長因子）組成，培養(yǎng)基的配方一直在改進(jìn)，其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等?；A(chǔ)培養(yǎng)基絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*（...

2011 07-22

限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)優(yōu)勢效應(yīng)

某些限制性內(nèi)切酶對同一底物的不同位點(diǎn)切割效率不同，這種現(xiàn)象被稱為內(nèi)切酶的位點(diǎn)優(yōu)勢效應(yīng)。1975年，Thomas和Davis（1）發(fā)現(xiàn)EcoRI并不是隨機(jī)切割λDNA分子上的5個(gè)識別位點(diǎn)，其中對λDNA...

2011 07-19

IHC實(shí)驗(yàn)熱誘導(dǎo)的抗原修復(fù)的可能機(jī)制

抗原修復(fù)（antigenretrieval；AR）是否可能?理論研究上尚未清楚，但是以高溫、高壓對常規(guī)固定石蠟切片進(jìn)行抗原修復(fù)處理的實(shí)踐表明，可以提高抗原—抗體陽性檢測率，同時(shí)也可能會出現(xiàn)假陽性，現(xiàn)已...

2011 07-12

RNA提取常見問題

1、RNA降解A、新鮮細(xì)胞：如果試劑沒有問題，且外源性污染也可以排除，那么降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養(yǎng)皿中裂解細(xì)胞，一定要使裂解液能覆蓋住細(xì)胞。B、新鮮組織：某些富含內(nèi)源核...

2011 07-04

抗體—微珠勻漿法

一種在抗體—微珠基質(zhì)上快速捕獲抗原的方法是將抗原溶液與微珠混合，旋轉(zhuǎn)或振蕩制成勻漿。這種方法可使抗原和固相化的抗體之間zui大限度地接觸，是一種促使結(jié)合反應(yīng)快速完成的方法。結(jié)合反應(yīng)完成后，將勻漿裝入層...

2011 06-30

質(zhì)粒提取純度不高的因素

A、蛋白質(zhì)污染建議：選擇推薦量的菌體，離心后小心吸取上清，如果上清液中混有懸浮物，可再次離心，以*去除蛋白質(zhì)。B、RNA污染建議：檢查配送的RNAseA是否*加入到BufferA1中，加入RNAseA...

2011 06-27

單克隆抗體細(xì)胞的選擇

（一）脾細(xì)胞1．材料（1）免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。（2）1640培養(yǎng)液（3）2.5％FCS－1640營養(yǎng)液2．操作方法（1）拉頸或用CO2處死小白鼠。（2）將小鼠放于70％酒精中浸泡消...

2011 06-20

脂肪酸的β-氧化過程

一、脂肪酸的β-氧化過程肝和肌肉是進(jìn)行脂肪酸氧化zui活躍的組織，其zui主要的氧化形式是β-氧化。此過程可分為活化，轉(zhuǎn)移，β-氧化共三個(gè)階段。1.脂肪酸的活化脂肪酸參加代謝前和葡萄糖一樣也先要活化...

2011 06-16

人們抗壓能力的蛋白的發(fā)現(xiàn)

們每天都要面對各種各樣的壓力，有的人精神狀態(tài)好，能坦然面對；有的人則惶惶不安，進(jìn)而患上抑郁癥、焦慮癥等精神疾病。之前這種差異背后的病理機(jī)制尚不清楚，不過近日研究小組發(fā)表在《自然》雜志上的報(bào)告稱，人大腦...