懸浮細(xì)胞的分離方法

時(shí)間：2016/1/8閱讀：338

從人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)取出的標(biāo)本組織是結(jié)合緊密的多種細(xì)胞，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖；若需獲取大量細(xì)胞，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離成單個(gè)細(xì)胞。若血液、羊水、胸腔積液或腹水等標(biāo)本離心分離方法獲取。

(一)材料

1.標(biāo)本血液、羊水、胸腔積液或腹水等懸液材料。

2.試劑PBS、培養(yǎng)液。

3．器具吸管、離心管、培養(yǎng)瓶。

(二)實(shí)驗(yàn)方法

1.標(biāo)本材料若是來(lái)自血液、羊水、胸腔積液或腹水的懸液材料，zui簡(jiǎn)單的方法是采用1000r／min低速離心10min。值得注意的是離心的速度過(guò)大，離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)擠壓細(xì)胞造成細(xì)胞的損傷甚至死亡。

2·離心的沉淀先用無(wú)鈣、鎂PBS洗兩次，再用培養(yǎng)液洗一次后，調(diào)整適當(dāng)細(xì)胞濃度后分瓶培養(yǎng)。

3.若選用懸液中某些細(xì)胞，經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層．這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

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