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上海瑞齊生物科技有限公司

C肽*說(shuō)明書(shū)

時(shí)間:2011-1-16閱讀:1201
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C肽*說(shuō)明書(shū)

C肽*說(shuō)明書(shū)藥品名稱
通用名稱:碘[125I]C肽*
英文名稱:Iodine[125I]C-peptide Radioimmunoassay Kit
漢語(yǔ)拼音:Dian [125I] C-tai Fangshemianyifenxi Yaohe
C肽*說(shuō)明書(shū)成分
性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清,無(wú)沉淀或絮狀物;凍干組分應(yīng)成疏松狀,復(fù)溶后應(yīng)無(wú)沉淀或絮狀物。
【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I],其物理半衰期(T½)為60天。
臨床意義
C肽(C-Peptide,C-P)是由31個(gè)氨基酸組成的直鏈多肽,分子量3021。由胰島素原在轉(zhuǎn)化酶的作用下,生成等克分子的C-肽和胰島素。由于C肽和胰島素以等摩爾的比例從胰島素細(xì)胞釋放至血液,因此測(cè)定血清C-肽可以反映胰島β細(xì)胞功能;此外,由于胰島素抗體和C-肽沒(méi)有交叉反映,而藥用胰島素中不含C肽,所以外源性胰島素不影響C肽的放免測(cè)定。因此,測(cè)定血清C肽對(duì)于接受胰島素治療的物種更能地判斷β細(xì)胞的分泌功能。而且對(duì)于糖尿病的分型,治療和預(yù)后估計(jì)以及對(duì)于糖代謝有關(guān)疾病的研究具有十分重要的意義。
本藥盒主要用于測(cè)定血清C-P含量。
測(cè)定原理
本方法采用競(jìng)爭(zhēng)放射免疫分析法,即標(biāo)準(zhǔn)或待測(cè)樣品中的C-P和125I-C-P共同與*的特異性C-P抗體在適宜的條件下進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)。一部分125I-C-P與抗體結(jié)合形成復(fù)合物,而另一部分呈游離狀態(tài)。125I-C-P與抗體結(jié)合的比例取決于標(biāo)準(zhǔn)或待測(cè)樣品中非標(biāo)記C-P的含量,非標(biāo)記C-P的含量越高,125I-C-P與抗體形成復(fù)合物越少,非標(biāo)記C-P的含量越低,125I-C-P與抗體形成復(fù)合物越多??乖?抗體復(fù)合物用免疫分離劑沉淀下來(lái),測(cè)定沉淀物的放射性計(jì)數(shù)。經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)處理后可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線,從標(biāo)準(zhǔn)上查出被測(cè)樣品的C-P含量(數(shù)據(jù)可由計(jì)算機(jī)自動(dòng)處理)。
C肽*說(shuō)明書(shū)適用儀器】適用于各類γ-*。
樣本要求
取靜脈血分離血清,待測(cè);如不立即測(cè)量,可將樣品密封后,置于-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè),-20℃保存不超過(guò)一個(gè)月。冰凍樣品在保存過(guò)程中應(yīng)避免反復(fù)凍融。冰凍樣品測(cè)定前,講樣品置于室溫或常溫水中融化,并充分搖勻。
用法用量
1 試劑配制、使用方法和保存
(1)C-P標(biāo)準(zhǔn)品:凍干品,向每瓶標(biāo)準(zhǔn)品中準(zhǔn)確地加入1ml緩沖液溶解。溶解后搖勻方可適用。溶解后各標(biāo)準(zhǔn)濃度值分別為0.25,0.5,1.0,3.0,6.0,12.0ng/ml。標(biāo)準(zhǔn)復(fù)溶后在-20℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
(2)125I-C-P:凍干品,用緩沖液溶解,每瓶加5ml,加樣前搖勻。每瓶標(biāo)記物放射性不大于74KBq(2μCi),沒(méi)用完的標(biāo)記物-20℃保存可穩(wěn)定42天。
(3)兔抗-C-P抗體:凍干品,用緩沖液溶解,每瓶抗體加­_ml(如不填寫(xiě)100T加10ml,50T加5ml緩沖液溶解)??贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
(4)驢抗兔免疫分離試劑:液體,加樣前必須搖勻!2~8℃保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后45天內(nèi)穩(wěn)定。
(5)C-P緩沖液:液體,2~8℃保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。
(6)C-P質(zhì)控血清:凍干品,使用前向每瓶質(zhì)控血清中準(zhǔn)確加入0.5ml蒸餾水溶解。復(fù)溶后-20℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。有效期及附值,詳見(jiàn)質(zhì)控血清適用說(shuō)明書(shū)。
C肽*說(shuō)明書(shū)2 測(cè)定步驟
取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)NSB、S0~S6和待測(cè)樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑?。┌ù郎y(cè)樣品要搖勻,并且平衡到室溫。
加樣程序表                                                  單位:μl
3 數(shù)據(jù)處理
(1) 聯(lián)機(jī)處理:由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用logit-log或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
(2) 手工作圖或計(jì)算器處理:
1). 百分結(jié)合率計(jì)算:設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式為:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%
2). logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為: logit=ln(B/ B0)/(1-B/ B0
3). 手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在logit-log坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(理想化時(shí)是一條直線)。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是zui后的濃度值。
4). 計(jì)算器處理:使用有線性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書(shū)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例(僅供參考,不得用于實(shí)際計(jì)算)。
參考正常值
空腹血清C-P參考正常值:平均值1.6ng/ml,范圍0.6~3.4 ng/ml。
餐后血清C-P峰值約為空腹時(shí)的5倍,峰值一般出現(xiàn)在餐后30~60分鐘(與進(jìn)食食品種類有一定關(guān)系),3小時(shí)后接近空腹值。
單位換算:1ng/ml=100ng/dl=1000ng/l=1μg/l=0.331nmol/l
由于地區(qū)及使用儀器不同,所測(cè)的正常值會(huì)存在一定的差異,所以本說(shuō)明書(shū)提供的正常值僅作參考,各實(shí)驗(yàn)室能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍。
產(chǎn)品性能指標(biāo)
1.    測(cè)定范圍:0.25~12ng/ml
2.    靈敏度0.1 ng/ml
3.    精密度:批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<10%;批間變異系數(shù)(CV)<15%。
4.    使用期限:見(jiàn)產(chǎn)品外包裝。
禁忌】本品僅供體外診斷用!
注意事項(xiàng)
1.    收到試劑盒后,盡快存放在2~8℃。
2.    使用前請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀此說(shuō)明書(shū)。
3.    由于標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)記物溶解后易失活,溶解后應(yīng)及時(shí)保存在-20℃條件下,必要時(shí)分成若干份-20℃保存。
4.    不同藥盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。
5.    吸棄上清液時(shí),注意不得損失沉淀物,否則將明顯影響測(cè)定結(jié)果。
6.    當(dāng)樣品中C-P濃度高于F點(diǎn)濃度時(shí),可將樣品用緩沖液稀釋5-10倍后復(fù)測(cè),測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)即為樣品的濃度。
7.    藥盒請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。
8.    臨床標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性,請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。
9.    使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù),放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。
10.使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。
 

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