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當(dāng)前位置:上海子實(shí)生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>誘發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝癌的幾種方法
造模原理:利用外源性化學(xué)致癌因素引起細(xì)胞遺傳特性異常,呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增值活性,形成癌癥。常用的致癌物質(zhì)有:DEN(乙亞硝基胺)、DBA(4-二甲基氨基偶氮苯、2AAF(2-乙酰氨基酸)、OAAT(亞胺基偶氮甲苯)和huang曲霉素等。
1、DEN誘導(dǎo):取體重250g左右的封閉群大鼠,雌雄不限,喂養(yǎng)普通飼料,隨意飲水,給與0.25%的DEN水溶液0.25~1mL灌胃或稀釋10倍放在飲水瓶中自由飲水,劑量為每天2~10ml/kg喂養(yǎng)半年以上。
2、OAAT誘發(fā)小鼠肝癌:用1% OAAT溶液涂在小鼠的兩肩胛間皮膚上,隔日一次,每次2~3滴,一般涂100次,連續(xù)7~8周即可。
3、DBA誘發(fā)大鼠肝癌:用含0.06% DBA的飼料喂養(yǎng)大鼠,飼料中DBA不應(yīng)超過1.5~2mg/kg,連續(xù)喂養(yǎng)4~6個(gè)月。
4、huang曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌:用0.001~0.015 ppm huang曲霉素的飼料喂6個(gè)月。
總結(jié): DEN誘發(fā)大鼠致癌率為70%,DBA為60%,OAAT涂抹法7~8周即可出現(xiàn)*個(gè)腫瘤。huang曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌發(fā)生率為80%。上述方法從病因?qū)W角度分析,與人體腫瘤較為近似,可用于腫瘤特點(diǎn)的深入研究。
整體課題外包和整體實(shí)驗(yàn)服務(wù)
1、動(dòng)物模型:糖尿病模型、帕金森動(dòng)物模型、腦中風(fēng)動(dòng)物模型、脊髓損傷動(dòng)物模型、肝損傷動(dòng)物模型、裸鼠成瘤模型、腹腔注射、灌胃、尾靜脈注射等。
2、細(xì)胞功能檢測(cè):慢病毒、腺病毒、合成試劑或RNAi類產(chǎn)生的基因過表達(dá)或基因沉默、細(xì)胞遷移和侵襲檢測(cè)、細(xì)胞凋亡檢測(cè)(tunel和流式檢測(cè))、細(xì)胞周期檢測(cè)(流式方法、Brdu)、細(xì)胞克隆形成、淋巴細(xì)胞分離、原代細(xì)胞分離培養(yǎng)、耐藥細(xì)胞株建立、穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建等。
3、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn):RT-PCR、QPCR、載體構(gòu)建、基因芯片等
4、蛋白檢測(cè):免疫組化、westerblot、ELISA、蛋白芯片等。
5、病理檢測(cè):HE染色、病理分析等。
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