產(chǎn)品名稱：人羊膜上皮細(xì)胞

英文名稱：Human Amniotic Epithelial cells

組織來(lái)源：胎盤

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

人羊膜上皮分離自胎盤組織；胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的物質(zhì)，其光滑，無(wú)血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的功能。

實(shí)驗(yàn)室分離的人羊膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的人羊膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人羊膜上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠賴酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： LOXL2 ELISA Kit

Monkey maix metalloproteinase 11 (MMP11) ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)檢測(cè)試劑盒

RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFT4(HumanFreeThyroxine)ELISAKit人游離甲狀腺素

細(xì)胞琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit大鼠前心肽(Pro-ANP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

TNFSF12重組大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ELK1 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗原 0.5mgELK1 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗原

GADD45A重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白

PECAM1 Protein Mouse 重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白

ELK1 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗原 0.5mgELK1 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗原

IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白

TNFSF12重組大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

PECAM1 Protein Mouse 重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白

GADD45A重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： TGFβ1 ELISA Kit

Human pulmonary activation regulated chemokine (PAFA/CCL18) ELISA Kit 人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PAFA/CCL18)檢測(cè)試劑盒

rabbitTestoterone,TELISAKit 兔子睪酮(T)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBDNFELISAKit大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子

細(xì)菌總巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

RabbitCrosslaps,CrELISAKit兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人羊膜上皮細(xì)胞酸性成纖維生長(zhǎng)因子   英文名稱：   acid fibroblast growth factor   規(guī)格：      英文縮寫：   a-FGF

堿性成纖維生長(zhǎng)因子   英文名稱：   basic fibroblast growth factor   規(guī)格：      英文縮寫：   b-FGF

成纖維生長(zhǎng)因子-4   英文名稱：   fibroblast growth factor 4   規(guī)格：      英文縮寫：   FGF-4

成纖維生長(zhǎng)因子-4   英文名稱：   fibroblast growth factor 4   規(guī)格：      英文縮寫：   FGF-4