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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法

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更新時(shí)間:2019-03-07 14:08:03瀏覽次數(shù):3482次

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腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。

腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法中含有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)所需要各種試劑組分,如:引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等,PCR反應(yīng)液混合液中加入檢測(cè)樣品,即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷,陽性樣本將在相應(yīng)大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。
產(chǎn)品名稱:腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法
編號(hào):EY00P1420
分類:PCR-熒光探針法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

產(chǎn)品特點(diǎn):
腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
熒光PCR如何實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)控的呢?
Ø     腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法PCR反應(yīng)體系中加入熒光染料
Ø       所有的定量PCR儀器都有三個(gè)共同的組成部分(檢測(cè)器、激發(fā)光源、熱循環(huán)模塊)
Ø       在擴(kuò)增過程中,熒光信號(hào)隨著PCR產(chǎn)物的增加而增強(qiáng)
Ø       每個(gè)循環(huán)結(jié)束后,定量PCR儀器通過光學(xué)系統(tǒng)記錄熒光信號(hào)的增加
Ø       PCR軟件計(jì)算出數(shù)據(jù),用于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析
     ARMS檢測(cè)方法;1個(gè)SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)雙管反應(yīng),含目的基因檢測(cè)及內(nèi)參檢測(cè)雙通道。  ?

注意事項(xiàng):
1.腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
使用方法:
腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
4.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
纖維素酶MES Buffer,1.0M,pH7.4  1瓶

纖維素 DE-52MES Buffer,1.0M,pH7.5  1瓶

MES Buffer,1.0M,pH8.0  1瓶

化銫MES Buffer,1.0M,pH8.5  1瓶

十六烷基三基MES Buffer,1.0M,pH9.0  1瓶

CHAPSMES Buffered Saline,5X,pH6.5  1瓶

2-( 環(huán)己基 ) 烷磺酸MES Buffered Saline,5X,pH7.0 1瓶

幾質(zhì)MES Lysis Buffer with NP-40  1瓶

化銨 TMES Lysis Buffer with NP-40,2X  1瓶

矮壯素MES Lysis Buffer with Triton  1瓶

霉素MES Lysis Buffer with Triton,2X 1瓶

4-  -1- 萘酚MES SDS Running Buffer,20X1瓶

MES, Free Acid, Monohydrate1瓶

膽酸Metha瓶

化Methyl Cellulose1瓶
腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒方法n-Amylmercaptan規(guī)格:StandardforGC,≥99.5%(GC)

Naltrexonehydrochloride規(guī)格:>99%,BR

Nalpha-Formyl-DL-tryptophan規(guī)格:0.98

Nalpha-BOC-D-Argininehydrochloridehydrate規(guī)格:BR

Nalpha-Benzoyl-L-arginine規(guī)格:>98%,BR

NaloxoneHCldihydrate規(guī)格:>98%,二水合物,類受體拮抗劑

Nalidixicacid規(guī)格:>98%

Naftopidildihydrochloride規(guī)格:>98%,BR

Naftopidildihydrochloride規(guī)格:含量測(cè)定

NaftifineHydrochloride規(guī)格:含量測(cè)定

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