血磷濃度測試盒_離子系列_分光光度法
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
血磷主要指血中的無機(jī)磷,以無機(jī)磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關(guān)系密切,在以mg/dL表示時,二者的乘積([Ca]×[P])為30~40。當(dāng)([Ca]×[P])>40,則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織;若([Ca]×[P])<35則妨礙骨的鈣化,甚至可使骨鹽溶解,影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對穩(wěn)定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對平衡。上述平衡受到甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調(diào)節(jié)。
血磷濃度測試盒_離子系列_分光光度法
測定原理:
去除血清中有機(jī)磷后,無機(jī)磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸,被還原后呈藍(lán)色,在620nm有光吸收;通過測定620 nm吸光度,計算血液中磷含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體62.5mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體3.1mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前配制,依次加入22 mL蒸餾水充分溶解,再加入試劑二,充分混合。
標(biāo)準(zhǔn)液:液體1mL×1支,0.02 m mol/L無機(jī)磷,4℃保存。
血磷濃度測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到620 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 取出標(biāo)準(zhǔn)液,室溫解凍。
3. 血清預(yù)處理:吸取50 μL血清,加950μL試劑一,混勻后室溫8000rpm,離心10min,取上清液,待測。
4. 空白管:取1mL玻璃比色皿,依次加入250μL蒸餾水,250μL試劑一,500μL試劑三,混勻后靜置10min,于620 nm測定吸光度,記為A空白管。
5.標(biāo)準(zhǔn)管:取1mL玻璃比色皿,依次加入250μL標(biāo)準(zhǔn)液,250μL試劑一,500μL試劑三,混勻后靜置10min,于620 nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
6. 測定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入250μL上清液,250μL試劑一,500μL試劑三,混勻后靜置10min,于620 nm測定吸光度,記為A測定管。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。