血鋅濃度測試盒_離子系列_分光光度法
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
鋅是必需的微量元素之一,在胰島素和卟啉代謝中也起重要作用。
測定原理:
在pH 8.5~9.5的溶液中,Zn2+與鋅試劑生成藍(lán)色配位化合物,在620nm有大吸收峰。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、蒸餾水和無水乙醇。
試劑組成和配制:
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。(甲醇自備)
試劑二:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前1天配制,加入25 mL無水乙醇充分溶解,蓋緊,過夜待用。4℃保存可穩(wěn)定約1個(gè)月,如顏色變黃,則已失效。
標(biāo)準(zhǔn)液:液體1mL×1支,10 μ mol/L Zn2+標(biāo)準(zhǔn)液。4℃保存。
血鋅濃度測試盒_離子系列_分光光度法
測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到620 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)液解凍:提前取出標(biāo)準(zhǔn)液,置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管:取EP管,依次加入500 μL蒸餾水,1000 μL試劑一,混勻;室溫,8000g,離心10min,小心吸取上清液500 μL,加入1mL玻璃比色皿,加入500μL試劑二,500μL試劑三,充分混勻后25℃靜置10min,于620 nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,依次加入500 μL標(biāo)準(zhǔn)液,1000 μL試劑一,混勻;室溫,8000g,離心10min,小心吸取上清液500 μL,加入1mL玻璃比色皿,加入500μL試劑二,500μL試劑三,充分混勻后25℃靜置10min,于620 nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測定管:取EP管,依次加入500 μL血清,1000 μL試劑一,混勻;室溫,8000g,離心10min,小心吸取上清液500 μL,加入1mL玻璃比色皿,加入500μL試劑二,500μL試劑三,充分混勻后25℃靜置10min,于620 nm測定吸光度,記為A測定管。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
血鋅濃度計(jì)算公式:
血鋅濃度(μ mol/ L)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]
= 10×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)液:10 μ mol/L Zn2+;