(輔酶Ⅰ系列)甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類(lèi)產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物，對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶（ADH）的家庭成員之一，廣泛存在于原核和真核生物中，該酶能利用NAD+作為輔酶，將有毒的甲醛氧化，是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。
(輔酶Ⅰ系列)甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒
測(cè)定原理：
甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產(chǎn)生NADH，在340nm處的吸光值會(huì)增加，測(cè)定340nm處的吸光值變化，可計(jì)算得到甲醛脫氫酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入6mL水溶解待用，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1支，4℃保存；臨用前加入1.5mL水溶解待用。
試劑四：液體1.5mL×1支，4℃避光保存。
FDH酶活計(jì)算：
（1）按蛋白濃度計(jì)算
酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
FDH酶活（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T = 643×△A÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
FDH酶活（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T =643×△A÷W
（3）按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
FDH酶活（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)））÷T= 643×△A÷細(xì)胞數(shù)量
（4）按液體體積計(jì)算
酶活定義：每mL樣本每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
FDH酶活（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T=643×△A
：NADH微摩爾消光系數(shù)，6.22×10-3 L/µmol/cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.02mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T，反應(yīng)時(shí)間，5min；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g
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