抗原抗體反響指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)作的特異性反響。這種反響即可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行，也能夠在機(jī)體外進(jìn)行?？乖贵w反響的過程是通過一系列的化學(xué)和物理改變，包含抗原抗體特異性和非特異性促凝聚兩個階段，以及由親水膠體轉(zhuǎn)為疏水膠體的改變。
抗原抗體反響的特色主要有三性：即特異性、份額性、可逆性。 
特異性（specificity） 是抗原抗體反響的zui主要特征，這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性斷定的。這種高度的特異性在傳染病的確診與防治方面得到有用的運(yùn)用。隨著免疫學(xué)技能的開展進(jìn)步，還將在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)范疇得到愈加深化和廣泛的運(yùn)用，比如腫瘤的確診和特異性醫(yī)治等。
份額性（proportionality） 是指抗原與抗體發(fā)作可見反響需遵從必定的量比，只有當(dāng)二者濃度份額適其時才呈現(xiàn)可見反響，在抗原抗體份額適當(dāng)或抗原稍過剩的情況下，反響zui*，構(gòu)成的免疫復(fù)合物沉積zui多、zui大。而當(dāng)抗原抗體份額超越此范圍時，反響速度和沉積物量都會敏捷下降乃至不呈現(xiàn)抗原抗體反響。
可逆性（reversibility）是指抗原抗體構(gòu)成復(fù)合物后，在必定條件下又可解離康復(fù)為抗原與抗體的特性。由于抗原抗體反響是分子外表的非共價鍵，所構(gòu)成的復(fù)合物并不結(jié)實(shí)，能夠隨時解離，解離后的抗原抗體仍堅(jiān)持本來的理化特征和生物學(xué)活性。
抗原抗體反響的運(yùn)用
一、抗血清的制備
1．免疫動物
（1）抗原：免疫動物是制備抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、細(xì)菌或許別的蛋白質(zhì)抗原，假如運(yùn)用半抗原如小分子激素等，有必要與大分子載體連接。抗原的用量視抗原品種及動物而異，—次打針小鼠能夠少至幾個微克，免、羊乃至更大的動物每次打針的量就相應(yīng)添加，從幾百μg／次至幾mg／次。
〔2）佐劑及乳化：佐劑能夠協(xié)助抗原在打針部位緩慢釋放，以添加免疫影響的作用。佐劑有*和不*佐劑之分。*佐劑加有滅活的分枝桿菌（如卡介苗）或棒狀桿菌。福氏佐劑可從試劑公司購買，也可用羊毛脂和石蠟油按1：2—4混合自行制備。佐劑與抗原按1：1的份額混合乳化為均勻的乳液，放置后不會發(fā)作油水別離。
（3）免疫動物：常用于制備抗血清的動物打豚鼠、家免、小鼠、大鼠等，假如大量生產(chǎn)可用動物羊、馬等，動物承受免疫的乳液量小鼠為1．0—2．0 mL，家兔為2—4mL。抗原免疫動物的路徑取決于動物品種、抗原特性和是否運(yùn)用佐劑。腹腔打針（i．p），肌肉打針（i．m），皮內(nèi)打針（i．d．）和皮下打針（s．c．）適宜于任何抗原，這些路徑主要影響局部淋巴結(jié)發(fā)作免疫應(yīng)對，初度免疫和免疫加強(qiáng)打針均可運(yùn)用。靜脈打針（i.v.）則只適宜于可溶性抗原及渙散的單細(xì)胞懸液，且不能運(yùn)用佐劑，其誘發(fā)的免疫應(yīng)對主要發(fā)作在脾臟。此外，在單克隆抗體制備時，亦可用脾臟直接打針或體外免疫辦法，尤其對微量抗原對比有用。體外免疫辦法也常用于人源單克隆抗體的制備。體外免疫時將脾細(xì)胞或外周血淋巴細(xì)胞（包含B細(xì)胞，T細(xì)胞及抗原遞呈細(xì)胞）與抗原一同作體外培養(yǎng)，然后再與骨髓瘤細(xì)胞融合。初度免疫后要通過2—3次以上的免疫加強(qiáng)以保證能構(gòu)成較高水平的IgC抗體。兩次免疫打針之間的時刻距離，通常3—4周對比適宜大多數(shù)動物，小動物可距離10—14d，大動物則在2月擺布。在免疫加強(qiáng)zui終一次打針后的一星期內(nèi)搜集抗血清，可取得高水平的抗體。
2、抗血清的純化與保留
（1）采血：加強(qiáng)免疫的動物2—3次后，可通過耳靜脈或眼球（小鼠）采血，進(jìn)行抗血清效價測定。當(dāng)效價到達(dá)理想的高度后，能夠采血。采血辦法能夠從心臟直接取血，也可通過動脈放血。待血液凝結(jié)后用針筒或吸管汲取血清。
（2）抗血清的純化與保留：除抗體外血清中含有多種別的蛋白成分。為了防止這些蛋白質(zhì)攪擾抗體（免疫球蛋白）符號反響和抗原抗體反響，抗血清可通過純化以取得單一的機(jī)體（常為IgG）組分。常用的純化IgG的辦法為飽滿硫酸胺鹽析和層析法。蛋白質(zhì)在不一樣的鹽濃度的溶液中，其溶解度不一樣，鹽離子攪擾蛋白質(zhì)和水分子間氫鍵構(gòu)成，由于水—鹽比水—蛋白質(zhì)更安穩(wěn)，蛋白質(zhì)即可從溶液中沉積出來。蛋白質(zhì)分子越大，沉積時所需鹽離子濃度越低。免疫球蛋白（Mr 1.5×105）比血清中主要蛋白質(zhì)白蛋白（M r 6.7×104）的分子大得多，抗體在30％—50％飽滿度的硫酸鹽中分出，而白蛋白需在70％—80％飽滿度才分出，因而常用33％飽滿度的硫酸胺純化血清中的IgG。鹽析時為了削減抗體變性，需在4℃進(jìn)行，一起用pH8.0緩沖液稀釋抗血清，以削減蛋白濃度過高而發(fā)作共沉積。銨鹽的溶解度不隨溫度改變而顯著改變，0℃和25℃僅差3％，而鈉鹽則相差5倍，因而常在低溫沉積時用銨鹽，室溫沉積用鈉鹽。銨鹽對抗體的符號反響（如FITC和biotin符號時）有必定的攪擾作用。
鹽析法只能有些純化抗體，更高純度的抗體制劑可用層析法制備。 IgM五聚體相對分子質(zhì)量達(dá)9.7×10，比血清中任何別的蛋白都大，用分子篩層析很簡單將其純化。IgG在PH 8．0時帶負(fù)電荷，能與DEAE纖維素上的陽離子，因而可用離子交換層析來純化IgG。IgG純化zui常用的辦法為親和層析。IgG與葡萄球菌A蛋白和鏈球菌G蛋白具合高度的親和性，可用這兩種蛋白質(zhì)交聯(lián)親和層析柱將IgG純化。大多數(shù)IgG與蛋白APH為8—9，洗脫P(yáng)H為2—4；而與蛋白G的PH為5—7，洗脫P(yáng)H為9—10。C蛋白更適宜于IgG的純化，不光反響條件為溫文的弱酸性或弱堿性，而且與IgG的力高于A蛋白。G蛋自能與大多數(shù)動物品種的IgG，而A蛋白對小鼠IgG1、大鼠IgG2b、人IgG3、馬和綿羊IgG力弱或不能G蛋白和A蛋白均不能與雞IgG。
抗血清或純化的抗體在低溫保留可維持活性數(shù)年，反復(fù)凍融使抗體很快失活，被細(xì)菌或霉菌污染的抗血清或IgG成品也易失掉活性。稀釋的抗血清參加防腐劑*和保護(hù)劑如BSA等可于4℃保留。經(jīng)久保留常用等量甘油于—20℃以下冷藏。也可置于 50％飽滿硫酸銨中4℃保留，還能夠冷凍干燥保留。
3、抗血清的特性判定
依據(jù)不一樣意圖制備的抗血清，對其間所含抗體的濃度，特異性及免疫球蛋白品種的請求也不一樣。為了取得質(zhì)量和數(shù)量上合符請求的抗血清，在搜集動物血清前有必要對免疫作用進(jìn)行檢查，對收成后的抗血清也有必要對—些參數(shù)進(jìn)行剖析，如效價、親和力及穿插反響等。 依據(jù)不一樣的抗原性質(zhì)選用適宜的檢查辦法。zui常用的為免疫沉積，ELISA，放射免疫等。
效價又稱滴度（titer），是常用于表達(dá)抗血清中特異性抗體相對含量的—個半定量目標(biāo)，即在給定的條件下，—定量抗原的抗血清的稀釋度?？寡褰?jīng)一系列稀釋后（如倍比稀釋）與定量的抗原反響，以能檢查抗血清zui大稀釋倍數(shù)即為該抗血清的效價。不一樣的檢查辦法測定同一種抗血清的效價，靈敏度不一樣，抗血清的效價也不一樣，如沉積反響（瓊脂雙擴(kuò)散）與ELISA二者的效價相差甚大，后者遠(yuǎn)高于前者。放射免疫剖析（RIA）常用于符號小分子抗本來檢查抗血清的效價。
親和力（affinity）表明抗血清與相應(yīng)抗原的強(qiáng)度，是描繪抗體持異性的主要目標(biāo)，常用親和常數(shù)K表明。
親和常數(shù)K與抗原抗體反響的平衡常數(shù)有關(guān)：
抗體特異性與穿插反響：抗體是特異的。只與相應(yīng)抗原反響。實(shí)踐制備的抗體卻常有非特異性反響，這是由于抗原不純形成的。多組分抗原之間存在一起的抗原決定簇，或許兩個抗原決定簇結(jié)構(gòu)相似能與同一抗體，均可呈現(xiàn)抗體與異源抗原的穿插反響。用瓊脂雙擴(kuò)散能簡便直觀地反映不一樣抗原與同一抗血清，或不一樣抗血清與同一抗原的穿插反響。