1.類風(fēng)濕因子（rheumatoid factors,RF）在類風(fēng)濕病人、別的疾病以及正常人血清中,常富含較高或不一樣濃度的RF，RF通常為TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有與變性IgG發(fā)作非特異的特色，由于在ELISA測(cè)定中，其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨后參加的酶標(biāo)的特異抗體IgG，然后呈現(xiàn)假陽(yáng)性成果。尤其是在捕獲法IgM型特異抗體的測(cè)定中體現(xiàn)zui為顯著，由于此時(shí)固相包被的抗體為抗人弘鏈抗體，IgM型RF的存在可使其很多于固相。為避免RF對(duì)ELISA測(cè)定的攪擾，通?？梢圆杉{下述辦法：
（1）稀釋標(biāo)本：這在判別急性病原體傳染的特異IgM抗體如抗HAVIgM，抗HBclgM， TORCH的IgM抗體查驗(yàn)等尤為有用。由于急性傳染時(shí)，血循環(huán)中特異的IgM抗體滴度通常很高，而RF滴度通常相對(duì)要低得多。因而，在測(cè)定前對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋，特異的IgM因高滴度存在仍可檢出，而非特異的RF則會(huì)由于稀釋變成十分低的滴度，然后對(duì)測(cè)定幾乎不發(fā)作攪擾。如今，有些特異IgM檢查ELISA試劑盒不請(qǐng)求稀釋標(biāo)本，直接檢查，這么雖然方便了實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員的操作，但簡(jiǎn)單呈現(xiàn)假陽(yáng)性成果，而且由于某些慢性傳染，如HBV的傳染，血循環(huán)中抗HBelgM可繼續(xù)以必定的滴度存在，標(biāo)本不做稀釋即進(jìn)行檢查，即可呈現(xiàn)陽(yáng)性成果，然后失掉抗HBclgM用于HBV急性傳染的確診價(jià)值。因而，在臨床實(shí)驗(yàn)室，必定要運(yùn)用請(qǐng)求對(duì)標(biāo)本做1:1000稀釋的試劑盒進(jìn)行查驗(yàn)，然后確保相應(yīng)檢查項(xiàng)目成果的可靠性及臨床運(yùn)用價(jià)值。
（2）改變酶標(biāo)抗體：由于RF的是IgG的Fc片段，假如將待酶標(biāo)的抗體的F，片段酶切夫除，僅留下具有特異功用的F（ab’）2部分符號(hào)酶，則在測(cè)定中即可避免RF的攪擾。
（3）標(biāo)本中RF用變性IgG預(yù)先關(guān)閉：將經(jīng)熱變性（63℃，10min）的動(dòng)物如兔、羊等的IgG參加到標(biāo)本稀釋液中，或是將該變性IgG銜接至一顆粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然后參加臨床血清標(biāo)本，反響后，再吸出標(biāo)本進(jìn)行檢查。此外，在測(cè)定特異IgM時(shí)，也可運(yùn)用抗人IgG去掉臨床標(biāo)本中RF和IgG。
（4）測(cè)定抗原時(shí)，可在標(biāo)本中參加可使RF降解的還原劑：如2—巰基乙醇。2—巰基乙醇等還原劑可使抗體內(nèi)的巰基裂解，因而可以去掉RF的攪擾，但只適用于抗原測(cè)定。
（5）包被或酶標(biāo)二抗運(yùn)用特異的雞抗體IgY：RF不與雞IgY反響，假如包被和酶標(biāo)二抗均為雞IgY抗體，則不受標(biāo)本中RF的攪擾。
2.補(bǔ)體在固相酶免疫測(cè)定中，來(lái)自哺乳動(dòng)物的固相特異抗體和酶標(biāo)二抗均有激活人補(bǔ)體體系的功用。一方面，固相抗體和酶標(biāo)二抗可由于其在固相吸附及過(guò)程中，抗體分子發(fā)作變構(gòu)，然后其F, 段的補(bǔ)體C1，位點(diǎn)被露出出來(lái)，這么C1，就變成一個(gè)中介物將二者交聯(lián)起來(lái)，然后呈現(xiàn)假陽(yáng)性成果。另一方面，固相抗體也會(huì)由于活化補(bǔ)體的，關(guān)閉抗體的抗原表位才能，而致使假陽(yáng)性成果或使定量測(cè)定成果偏低。由補(bǔ)體致使的攪擾可通過(guò)下述辦法避免：
（1）對(duì)臨床血清標(biāo)本加熱滅活補(bǔ)體：選用56~C30min加熱可使標(biāo)本中的補(bǔ)體C1。滅活。
（2）包被或酶標(biāo)二抗運(yùn)用特異的雞抗體：雞抗體不激活人的補(bǔ)體體系，因而，運(yùn)用特異的雞抗體，不會(huì)呈現(xiàn)因補(bǔ)體激活而存在的假陽(yáng)性和假陰性攪擾。
3.異嗜性抗體（heterophilieantibodies）人類血清中富含抗嚙齒類動(dòng)物（如鼠、馬、羊等）的免疫球蛋白（lg）的抗體，即天然的異嗜性抗體。有研討表明，天然的異嗜性抗體（lgG）可分為兩類，一類（85%的假陽(yáng)性由其致使）可于山羊、小鼠、大鼠、馬和牛IgG的Fab區(qū)域，但不與兔IgG的Fab區(qū)。另一類（15%的假陽(yáng)性由其致使）可于小鼠、馬、牛和兔IgG的Fc區(qū)表位，但不與山羊和大鼠IgG的Pc區(qū)表位。異嗜性抗體可通過(guò)交聯(lián)固相和酶標(biāo)的單抗或多抗而呈現(xiàn)假陽(yáng)性反響。由異嗜性抗體致使的攪擾可通過(guò)下述辦法避免：
（1）運(yùn)用特異的兔F（ab’）2。片段作為固相或測(cè)定酶標(biāo)抗體。
（2）在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中參加過(guò)量的動(dòng)物Ig，關(guān)閉也許存在的異嗜性抗體。但參加量缺乏或亞類不一樣時(shí)無(wú)效。
（3）運(yùn)用靶特異的非Ig親和蛋白（affibody）代替固相或酶標(biāo)抗體之一。選用噬菌展現(xiàn)來(lái)自單個(gè)金葡萄球A蛋白（SPA）聯(lián)合文庫(kù)的人IgA親和蛋白，用于IgA的測(cè)定，不受異嗜性抗體的影響。
4.因運(yùn)用鼠抗體醫(yī)治或確診誘導(dǎo)的抗鼠Ig抗體在臨床上，有嘗試運(yùn)用鼠源性單克隆抗體進(jìn)行靶向醫(yī)治，及運(yùn)用放射性核索符號(hào)鼠源性單克隆抗體進(jìn)行印象確診等，均有也許使相應(yīng)病人體內(nèi)發(fā)作抗鼠抗體。這種抗鼠抗體對(duì)運(yùn)用鼠源性單克隆抗體的酶免疫測(cè)定，可發(fā)作假陽(yáng)性成果。由抗鼠抗體致使的攪擾可通過(guò)下述辦法避免：
（1）運(yùn)用的特異的抗體（F，。bf）:片段作為固相或測(cè)定酶標(biāo)抗體。
（2）在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中參加過(guò)量的鼠Ig，關(guān)閉也許存在的抗鼠抗體。
（3）運(yùn)用特異的雞抗體IgG作為固相和測(cè)定抗體。雞IgG不與人抗鼠抗體反響。因而，用其作為固相或酶標(biāo)抗體不會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性成果。
5.本身抗體 本身抗體如抗甲狀腺球蛋白、抗胰島索等，能與其相應(yīng)靶抗原成果構(gòu)成復(fù)合物，在ELISA辦法中可攪擾相應(yīng)原抗體的測(cè)定。為避免以上狀況呈現(xiàn)，可在測(cè)定前用理化辦法將其解離。
6. 溶菌酶溶菌酶可與等電點(diǎn)較低的蛋白有強(qiáng)的才能。免疫球蛋白等電點(diǎn)約為5，因而，在雙抗體夾心法ELISA測(cè)定中，溶菌酶可在包被的IgG和酶標(biāo)的IgG間構(gòu)成橋接，然后致使假陽(yáng)性。因而，為確保ELISA測(cè)定的可靠性，有必要從標(biāo)本中去掉溶菌酶或?qū)⑵潢P(guān)閉，Cu2+離子和卵白蛋白可有效地關(guān)閉溶菌酶，避免其銜接IgG。
內(nèi)源性攪擾要素通常包含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些本身抗體、因運(yùn)用鼠抗體醫(yī)治或確診誘導(dǎo)的抗鼠Ig抗體、穿插反響物質(zhì)等。在平時(shí)的臨床血清（漿）標(biāo)本中，有相當(dāng)份額不一樣程度的富含上述各種攪擾物質(zhì)，然后致使測(cè)定成果的假陽(yáng)性。