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大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒

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所在地上海市

更新時(shí)間:2017-09-27 13:52:57瀏覽次數(shù):824次

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大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒
英文名稱: Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T 檢測(cè)方法:固相夾心法 存儲(chǔ):2-8°C 保質(zhì)期:半年

大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒
英文名稱:  Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T 檢測(cè)方法:固相夾心法  存儲(chǔ):2-8°C  保質(zhì)期:半年

大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒

規(guī)格:48T/96T種屬:人類

檢測(cè)方法:固相夾心法存儲(chǔ):2-8°C

試驗(yàn)原理
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA.已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將待測(cè)物質(zhì)和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。

大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒內(nèi)容及其配制
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒自備材料

1)蒸餾水。
2)加樣器:5ul10ul、50ul100ul、200ul、500ul1000ul。
3)振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1)避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2)實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

本試劑盒試劑的準(zhǔn)備
1)標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液11稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。

大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的待測(cè)物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

 

 

勝隆生物經(jīng)過不斷的實(shí)驗(yàn)優(yōu)化和改進(jìn),積累了大量的經(jīng)驗(yàn),擁有專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)。利用專業(yè)的勝隆免疫技術(shù)自主研發(fā)的elisa試劑盒,能對(duì)血清及其它樣本定量檢測(cè)抗原,定性檢測(cè)特異性抗體。優(yōu)質(zhì)的試劑,*的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA檢測(cè)的方便性、穩(wěn)定性、重復(fù)性和可靠性方面都具有很大的優(yōu)勢(shì)。

試劑盒成分(2-8℃保存)    96孔配置         48孔配置        配置  

96/48人份酶標(biāo)板                    1塊板(96T            半塊板(48T       即用型

塑料膜板蓋                          1                     半塊                即用型

標(biāo)準(zhǔn)品                              1瓶(0.6ml            1瓶(0.3ml     按說明書稀釋

空白對(duì)照                            1瓶(1.0ml            1瓶(0.5ml        即用型

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液                    1瓶(5.0ml            1瓶(2.5ml        即用型

*標(biāo)記抗TXA2抗體              1瓶(6.0ml            1瓶(3.0ml         即用型

親和素鏈酶素-HRP                   1瓶(10ml             1瓶(5.0ml         即用型

洗滌緩沖液                          1瓶(20ml             1瓶(10ml      按說明書稀釋

底物A                              1瓶(6.0ml             1瓶(3.0ml       即用型

底物B                              1瓶(6.0ml            1瓶(3.0ml       即用型

終止液                              1瓶(6.0ml            1瓶(3.0ml       即用型

標(biāo)本稀釋液                          1瓶(12ml             1瓶(6.0ml       即用型  
勝隆生物經(jīng)過不斷的實(shí)驗(yàn)優(yōu)化和改進(jìn),積累了大量的經(jīng)驗(yàn),擁有專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)。同時(shí)也是國(guó)內(nèi)外專業(yè)的ELISA試劑盒批發(fā),
進(jìn)口ELISA試劑盒批發(fā),ELISA試劑盒,ELISA檢測(cè)試劑盒,ELISA檢測(cè)試劑盒批發(fā)供應(yīng)商。優(yōu)質(zhì)的試劑,
*的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件

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