吖啶橙(AO)是一種選擇性熒光陽離子染料，它能透過細(xì)胞膜，活細(xì)胞與死細(xì)胞均能被其染色。吖啶橙常用于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀技術(shù)中細(xì)胞生理學(xué)與細(xì)胞周期的分析，該細(xì)胞滲透型染色液可與其他很多染色液及方法聯(lián)合使用。

在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過完整細(xì)胞膜，將活細(xì)胞的細(xì)胞核染成均勻的綠色熒光；而凋亡細(xì)胞由于其染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片段，吖啶橙將細(xì)胞核染成黃綠色亮綠色熒光；死亡細(xì)胞呈橙色熒光，但熒光很弱甚至?xí)А?/span>

試劑盒組成

儲(chǔ)存條件

2-8°C 避光保存，有效期為 12 個(gè)月。

操作步驟

注意：以下操作適用于大多數(shù)細(xì)胞類型

1. 使用前請(qǐng)將小瓶離心。

2. 使用前將 10×緩沖液（組分 B）用雙蒸水稀釋成 1×緩沖液。

3. PBS 洗滌細(xì)胞兩次后，用適量的 1×緩沖液重懸細(xì)胞調(diào)整細(xì)胞濃度為 10⁶ 個(gè)/mL。

注意：貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。 在某些必要情況下，可使用 TritonX-100 進(jìn)行細(xì)胞通透。

4. 取 95 μL 細(xì)胞懸液，加入 5 μL AO 染色液，輕柔混勻。

5. 室溫避光孵育 1-5 分鐘。

注意：較好的染色濃度及培養(yǎng)時(shí)間，根據(jù)細(xì)胞的不同而不同。

6. 取 10 μL 混合液，滴加在一個(gè)干凈的載玻片上，并加蓋蓋玻片。

7. 在熒光顯微鏡下檢測(cè) Ex / Em = 488 / 1515nm 處的細(xì)胞。

警告！

使用前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書，為了您的安全，請(qǐng)佩戴手套，護(hù)目鏡，或是其他保護(hù)措施。

本試劑盒僅用于研發(fā)，不可藥用，家庭或其他。