吖啶橙(AO)是一種選擇性熒光陽離子染料，它能透過細胞膜，活細胞與死細胞均能被其染色。吖啶橙常用于熒光顯微鏡和流式細胞儀技術(shù)中細胞生理學與細胞周期的分析，該細胞滲透型染色液可與其他很多染色液及方法聯(lián)合使用。

在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過完整細胞膜，將活細胞的細胞核染成均勻的綠色熒光；而凋亡細胞由于其染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片段，吖啶橙將細胞核染成黃綠色亮綠色熒光；死亡細胞呈橙色熒光，但熒光很弱甚至會消失。

試劑盒組成

儲存條件

2-8°C 避光保存，有效期為 12 個月。

操作步驟

注意：以下操作適用于大多數(shù)細胞類型

1. 使用前請將小瓶離心。

2. 使用前將 10×緩沖液（組分 B）用雙蒸水稀釋成 1×緩沖液。

3. PBS 洗滌細胞兩次后，用適量的 1×緩沖液重懸細胞調(diào)整細胞濃度為 10⁶ 個/mL。

注意：貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養(yǎng)孔中原位染色。 在某些必要情況下，可使用 TritonX-100 進行細胞通透。

4. 取 95 μL 細胞懸液，加入 5 μL AO 染色液，輕柔混勻。

5. 室溫避光孵育 1-5 分鐘。

注意：較好的染色濃度及培養(yǎng)時間，根據(jù)細胞的不同而不同。

6. 取 10 μL 混合液，滴加在一個干凈的載玻片上，并加蓋蓋玻片。

7. 在熒光顯微鏡下檢測 Ex / Em = 488 / 1515nm 處的細胞。

警告！

使用前，請仔細閱讀說明書，為了您的安全，請佩戴手套，護目鏡，或是其他保護措施。

本試劑盒僅用于研發(fā)，不可藥用，家庭或其他。