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初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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學(xué)習(xí)下有關(guān)超濾的小知識(shí)

時(shí)間:2021/5/26閱讀:7794
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定義

??超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學(xué)性質(zhì)、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為最基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會(huì)透過,因此在大分子樣品處理中得到了廣泛應(yīng)用。膠狀或微粒狀物質(zhì)也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品顯著小于膜孔徑,則經(jīng)過膜處理可以達(dá)到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對(duì)于樣品更溫和,沒有發(fā)生容易導(dǎo)致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時(shí)可以完成對(duì)溶質(zhì)的除鹽。超濾的應(yīng)用不限于蛋白樣品的操作,也常用于核酸樣品制備,包括分子克隆和質(zhì)粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數(shù)分鐘內(nèi)被濃縮,回收率達(dá)到99%以上。離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時(shí)樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時(shí),原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。

超濾(Ultrafiltration, UF) 是對(duì)溶液中的極小顆粒及可溶性分子進(jìn)行分離的方法。這種分離主要基于分子的大小,但濾膜介質(zhì)的通透性也會(huì)受樣品的化學(xué)、分子及電荷特性的影響。超濾通常只能分
離那些大小相差3-5 倍以上的分子,而不適合分離大小相似的分子。

微濾(MF)是使用微孔膜介質(zhì)(即常見的濾膜),將大小在0.025μm 到10.0μm 之間的顆粒物或生物體從溶液中除去。雖然某些非膜材質(zhì)或深層介質(zhì)(如厚的玻璃纖維)也能夠去除顆粒,但只有濾膜具有精確的孔徑才能實(shí)現(xiàn)比較準(zhǔn)確的截留。在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,微濾最常被用來做樣品的除菌處理(0.1μm 微濾可以去除支原體等);在核酸和蛋白分析之前,也需要用微濾除去細(xì)胞裂解液中的完整細(xì)胞和細(xì)胞碎片。用于這類分離的膜孔徑一般在0.05μm到1.0μm之間。

特點(diǎn):超濾是一般動(dòng)態(tài)的、需要一定壓力的。
分子量范圍:常規(guī)從1KD~1000KD。
超濾形式分類:中空纖維、管式、卷式(實(shí)驗(yàn)室超濾大部分產(chǎn)品大部分利用卷式超濾平膜)。
根據(jù)超濾量的大小及形式超濾產(chǎn)品分類:超濾離心管、不同過濾面積的超濾膜包、卷式超濾組件、中空纖維超濾組件、超濾膜堆等等。

超濾離心管

當(dāng)處理料液量比較小的時(shí)候,如0.5毫升~20毫升,一般可以考慮用超濾離心管。

常規(guī)的離心機(jī)可以配套的2毫升、15毫升、50毫升也是超濾離心管的主力產(chǎn)品。一般超濾離心管容量規(guī)格會(huì)說內(nèi)管和外管,以上面3種外管為例,對(duì)應(yīng)的內(nèi)管一般是0.5、4~6、15~20毫升。

下面介紹下市售的三種主要品牌的超濾離心管情況:

品牌規(guī)格及市場(chǎng)情況
MILLIPORE內(nèi)管0.5/4/15ML,對(duì)應(yīng)外管2/15/50ML,分子量從3~100KD
PALL內(nèi)管0.5/5/20ML,對(duì)應(yīng)外管2/15/50ML,分子量從1~100KD
SARTORIUS內(nèi)管0.5/6/20ML,對(duì)應(yīng)外管2/15/50ML,分子量從3~1000KD

超濾膜包及系統(tǒng)

當(dāng)處理料液量50~5000ML的時(shí)候,可以考慮用不同過濾面積的超濾膜包。

超濾膜包一般可以配套蠕動(dòng)泵使用,每個(gè)品牌一般都有各自不同的配套系統(tǒng)。

下面介紹下市售的三種主要品牌的超濾膜包情況,都以過濾面積50平方厘米的為例:

品牌規(guī)格及市場(chǎng)情況
MILLIPORE處理量50~500ML,分子量從3~100KD,耐壓高、使用壽命長。
PALL處理量25~1000ML,分子量從1~1000KD,耐壓高、使用壽命長
SARTORIUS處理量50~500ML,分子量從3~100KD,耐壓低、使用壽命短

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