小鼠25羥基*3（25（OH）D3/25 HVD3）ELISA試劑盒基因工程試劑對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響
     免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng)，所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料，如抗原抗體，酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑，各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
小鼠25羥基*3（25（OH）D3/25 HVD3）ELISA試劑盒HBsAg試劑特點（檢測模式：臨床抗體夾心法）：包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復(fù)合單位，可測得HBsAg變異樣品，提高檢測的特異性（99.98%）提高檢測的靈敏度，應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說（PEI）HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品，對ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml
方法一　雙抗體夾心法
　　1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
　　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
　　　3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
　　　4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
　　　5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
對于定量檢測來說，主要還是一個準(zhǔn)確度的驗證。不過我看到別人寫的內(nèi)容比我自己想說的要好，所以就貼上去了。相對回收率可能會高于*的，如果只是說“損失程度”，其實是不準(zhǔn)確的。應(yīng)該說，回收率越接近*，說明這個試劑盒的準(zhǔn)確度越高。

生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子（GROβ/CXCL2/MGSA）  C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E（CLEC4E）

王進(jìn)輝 美麗線蟲凋亡基因（CED-3）  假定蛋白LOC677168 

胸腺白血病抗原（TLa）  淋巴抗原6復(fù)合物基因座A（Ly6a）

腫瘤特異性移植抗原（TSTA）  嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1（EAR1）

足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白（PCX） 混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域（MLKL）

乳腺癌易感蛋白1（BRCA-1） 過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α（PPARGC1）

T急性淋巴母白血病相關(guān)抗原（TALLA-1/CD231） 類似cDNA順序BC027382 

人腦微血管內(nèi)皮 核仁形成區(qū)嗜銀蛋白（Ag-NORs） 類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 

Elisa的發(fā)展