產(chǎn)品信息
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
YW015 | 支原體檢測試劑盒（PCR法） | 10T |
YW015 | 支原體檢測試劑盒（PCR法） | 20T |
一、產(chǎn)品信息
貨號 | 包裝規(guī)格 | 反應(yīng)體系 | 存儲 |
YW015 | 10T | 50μl | -20℃ |
YW016 | 20T | 50μl | -20℃ |
二、 試劑盒組分
支原體檢測試劑盒 (PCR法) (YW015)
編號 | 組分 | 規(guī)格 | 存儲 |
YW015A | PCR Master Mix | 300μl | -20℃ |
YW015B | Positive | 60μl | -20℃ |
支原體檢測試劑盒 (PCR法) (貨號YW016)
編號 | 組分 | 規(guī)格 | 存儲 |
YW016A | PCR Master Mix | 2*300μl | -20℃ |
YW016B | Positive | 2*60μl | -20℃ |
三、 產(chǎn)品簡介
支原體檢測試劑盒是利用PCR方法對支原體16SrRNA基因高度保守區(qū)域特異性片段進行擴增檢測。其中使用的引物探針為特異性修飾的探針，具有高靈敏性和高特異性。該試劑盒可用于各種生物材料(如細胞培養(yǎng)基、實驗動物分泌物、動物血清等)支原體感染的檢測。
支原體檢測試劑盒中所含的Mix能特異性擴增多種支原體16SrRNA基因片段，可以達到一次性檢測多
種支原體的目的。本試劑盒根據(jù)歐洲藥典中對于生物制藥生產(chǎn)過程中(參考資料：Europeanpharmacopoeia7.0,2.6.7.), 對于支原體的檢測要求定制而成，與傳統(tǒng)的選擇性培養(yǎng)基培 養(yǎng)檢測方法相比較，本方法更為快速，具有高靈敏性，高特異性和高性價比。不會由于培養(yǎng)法檢測時大量培養(yǎng)支原體可能帶來的次級污染的問題。
常見支原體種類：
支原體種類 | 中文名稱 | PCR條帶大小 |
M.orale | 口腔支原體 | 462 bp |
M.hyorhinis | 豬鼻支原體 | 464 bp |
A.laidlawii | 萊氏無膽甾原體 | 438bp |
M.salivarium | 唾液支原體 | 466bp |
M.arginini | jingansuan支原體 | 465bp |
M.fermentans | 發(fā)酵支原體 | 461bp |
M. hominis | 人型支原體 | 463bp |
M.pneumoniae | 肺炎支原體 | 470bp |
四、 操作步驟
1. 待檢樣品，直接取5μL上清液作為PCR模板； (注：懸浮細胞需要1000rpm離心4min )
2.反應(yīng)體系配置：
無菌水 | 18μL |
Master Mix | 27μL |
樣品/對照 | 5μL |
3.PCR 反應(yīng)程序：
95℃ | 3 min | ||
94℃ | 25 | sec | |
58℃ | 25 | sec | 35-40 cycles |
72℃ | 30 | sec | |
72℃ | 5 min | ||
4. 取 1 0 μLPCR 擴增產(chǎn)物，使用1.2 %瓊脂糖凝膠電泳檢測 PCR 結(jié)果。
結(jié)果分析：
不同種類的支原體檢測條帶大小不同，下圖列出了引起細胞污染的8大種類常見支原體，若PCR條帶在400bp～600bp范圍內(nèi)，均可判斷為支原體污染。也可將PCR產(chǎn)物進行TA克隆、測序進一步鑒定支原體的種類。
注意事項和免責(zé)說明：
本品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。
1.M.orale 2.M.hyorhinis 3.A.laidlawii 4.M.salivarium 5.M.arginini 6.M.fermentans 7.M.hominis
8.M.pneumoniae
