臍帶間充質(zhì)干細胞(UC-MSCs)是一類來源于發(fā)育早期中胚層的多能干細胞，與其他來源的MSCs相比，來源于臍帶的MSCs具有采集方便、無倫理爭議、免疫原性低、自我更新快、倍增速度穩(wěn)定和增殖能力強等特點。此外，來源于臍帶的MSCs的外泌體攜帶多種傷口愈合的相關因子，能夠促進成纖維細胞的遷移、增殖和膠原合成，因此臍帶MSCs外泌體被認為是臨床細胞治療和再生醫(yī)學的shouxuan
該產(chǎn)品由臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)獲得的上清液分離純化得到的外泌體，可用于實驗對照、直接進行負載和靶向改造、組織修復等研究。
產(chǎn)品性質(zhì)
名稱 | 臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體 |
規(guī)格 | 1E+11 Particles/ml |
外觀 | 白色粉末 |
pH | 7 |
無菌檢測 | 無菌生長 |
總蛋白濃度 | （BCA） |
純度 | ≥90% |
儲存條件：-80 ℃，1年
1：NTA檢測外泌體的粒徑分布和顆粒濃度：
將得到的外泌體震蕩分散均勻，用PBS稀釋至合適倍數(shù)，標記好樣本名稱、稀釋倍數(shù)、完成樣本的稀釋配制；測樣之前，先測試稀釋液：移液槍吸取200 μL稀釋液上機檢測，確認組件、儀器都處于正常運行；稀釋液測量完成，測試結果正常后開始測試樣本，取稀釋后的200 μL樣本上機檢測；待計數(shù)顆粒數(shù)達到100個以上時停止測試，導出數(shù)據(jù)結果，完成樣本檢測。
2：TEM觀察外泌體的形態(tài)：
重懸外泌體至50-100 μL 2% PFA中，將5 μL混合懸液加到Formvar-carbon載樣銅網(wǎng)上；也可將5-10 μL混合懸液滴加到封口膜上，將銅網(wǎng)Formvar膜面朝下放在懸液上。每個樣品準備2-3個銅網(wǎng)；將100 μL PBS加到封口膜上。用鑷子將銅網(wǎng) (Formvar膜面朝下) 放在PBS液滴上清洗（在所有步驟中，都應保持Formvar膜面濕潤，而另一面干燥）；將銅網(wǎng)放在50 μL 1%戊二醛液滴上5 min；將銅網(wǎng)放在100 μL ddH2O洗滌8次，每次洗2 min；將銅網(wǎng)放在50 μL草酸雙氧鈾液滴上（pH 7.0），5 min；將銅網(wǎng)放在50甲基纖維素液滴上10 min，冰上操作；銅網(wǎng)放到樣品臺頂端的不銹鋼環(huán)上，用濾紙吸去多余液體；空氣中干燥5-10 min；將銅網(wǎng)放在樣品盒內(nèi)，80 kV下拍攝電鏡照片。
3：Western Blot檢測外泌體標志物（三陽一陰）：
將分離純化得到的外泌體加入裂解液，裂解后吸取上清液，根據(jù)測定蛋白濃度稀釋樣本至合適濃度；裂解液加入4×LDS上樣緩沖液（B0007，Invitrogen），95 ℃煮5 min，待降至室溫后，瞬離；加樣：將15 μL樣本全部加到泳道中，并在樣本首尾加上marker；電泳：190 V，70 min；提qian10 min用甲醇活化PVDF膜；轉(zhuǎn)膜：轉(zhuǎn)膜液需要提前預冷，275 mA，70 min；封閉：配置1% BSA的TBST溶液，室溫封閉1 h；孵育一抗：4 ℃，搖床上過夜，抗體用1% BSA的TBST溶液稀釋；洗膜：1×TBST洗三次，10 min/次；孵育二抗：抗體用1% BSA的TBST溶液稀釋，室溫搖床1 h；洗膜：1×TBST洗三次，10 min/次；曝光拍照。
注意事項
本品僅限于專業(yè)人員的科學研究使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。
