實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介：
肝臟是人體中大的腺體，也是大的實質性臟器。肝間質細胞屬于成體干細胞，已有研究發(fā)現(xiàn)它可以向骨、軟骨、肌腱、脂肪、等分化。成體干細胞的向肌細胞的分化使得很多肌肉退行性、遺傳性的多了一種更佳的選擇。
產(chǎn)品名稱 | 組織來源 | 肝組織 | |
英文名稱 | Rat hepatic interstitial cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞特性：
1） 組織來源于實驗動物的正常肝組織。
2) 細胞鑒定：CD44熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式：長梭形，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf 原代間質 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
ELNELISAKit
大鼠孤腓肽(OFQ/N)elisa分析檢測試劑盒
OFQ/N ELISA Kit
豚鼠球蛋白G(IgG)elisa分析檢測試劑盒
IgGELISAKit
頂體形態(tài)花生凝集素熒光標記（PNA-FITC）染色試劑盒
大鼠游離β絨毛膜促性腺(f-βCG)elisa檢測試劑盒
轉基因玉米TC1507品系基因檢測試劑盒
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa檢測試劑盒
猴催乳素(PRL/LTH)elisa分析檢測試劑盒
PRL/LTH ELISA Kit
人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)elisa分析檢測試劑盒
DPYSL2ELISAKit
腺嘌呤二核苷酸(NADH)elisa檢測試劑盒
大鼠胱天蛋白酶3(CASP3)elisa檢測試劑盒
細胞丙酮酸激酶（PK）總活性比色法定量檢測試劑盒
人甘露糖受體(MR)elisa分析檢測試劑盒
MOSPD3蛋白抗體
MOSPD3
1號染色體開放閱讀框95抗體
C1ORF95
轉錄因子E3 Anti-TFE3
核糖體結合蛋白1抗體 Anti-RRBP1
核仁蛋白3抗體 Anti-Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD
3受體抗體 Anti-Vitamin D Receptor/VDR
Cy5標記的兔抗雞IgG H&L
大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)elisa分析檢測試劑盒
IFN-β/IFNB ELISA Kit
人核因子κB抑制物激酶α(IKK-α)elisa分析檢測試劑盒
大鼠肝間質細胞HumanIKK-αELISAkit
